斑点热群立克次体（SFGR）核酸检测试剂盒（荧光PCR法）

斑点热群立克次体（SFGR）核酸检测试剂盒（荧光PCR法）

产品概述
产品名称：斑点热群立克次体（SFGR）核酸检测试剂盒（荧光 PCR 法）
检测原理：基于实时荧光定量 PCR（qPCR），针对 SFGR 保守基因（如ompA、gltA、17kDa）设计特异性引物与TaqMan 荧光探针，扩增过程中收集荧光信号，实现定性 / 定量检测PMC。
用途：科研
规格：50 人份 / 盒。
保存与有效期：-20℃避光保存，12 个月有效期；避免反复冻融。

试剂盒组分
组分    规格
2× 荧光 PCR 预混液（含 Taq 酶、dNTP、缓冲液、Mg²⁺、UDG 防污染系统）    0.5 mL×1 管
SFGR 引物探针混合液（FAM 标记）    100 μL×1 管
内标（IC，如人 GAPDH 基因）引物探针混合液（VIC/HEX 标记）    100 μL×1 管
阳性对照（SFGR 质粒，1×10⁷拷贝 /μL）    50 μL×1 管
阴性对照（无酶纯水）    1 mL×1 管
模板稀释液    1 mL×1 管

适用仪器
实时荧光定量 PCR 仪：ABI 7500/7900、Bio-Rad CFX96、Roche LightCycler 480等。

操作流程（25 μL 体系）
核酸提取：取200 μL样本，用商品化 DNA 提取试剂盒提取核酸，洗脱至50 μL。
反应体系配制（冰上操作）：
2×PCR 预混液：12.5 μL
引物探针混合液：2 μL
内标引物探针：0.5 μL
待测核酸 / 对照：5 μL
无酶纯水：5 μL
扩增程序：
预变性：95℃，5 min，1 个循环。
PCR 扩增（40 循环）：95℃ 15 sec；60℃ 60 sec（FAM/VIC 通道采集荧光）。
结果判读：
阳性：FAM 通道Ct＜40，扩增曲线呈典型 S 型；内标正常（Ct＜35）。
阴性：FAM 通道无 Ct 或 Ct≥40；内标正常（Ct＜35）。
无效：内标无 Ct 或 Ct≥35，需重新检测。

注意事项
仅用于科研，不作临床使用。
严格分区：试剂配制区、样本处理区、扩增区，防止交叉污染。
样本采集后2~8℃可保存24 小时，-20℃可长期保存，避免反复冻融。
操作全程戴手套、口罩，废弃物按感染性废物处理。