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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
Diagnostic Kit for Enterococcus Faecium DNA(Real-Time PCR Method)
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50T/盒
粪肠球菌(EF)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
产品概述
产品名称:粪肠球菌(EF)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
检测原理:本试剂盒用一对粪肠球菌特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光 PCR 技术对粪肠球菌的 DNA 进行体外扩增检测,用于科研实验中对可疑感染者的病原学检测。
适用范围:科研实验、不可用于临床诊断。
适用仪器:ABI7500、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
产品规格与组分
包装规格 50T/盒
EF 反应液 500μL×2 管
酶液 50μL×1 管
EF 阳性质控品 50μL ×1 管
阴性质控品 250μL ×1 管
操作流程
样本处理:磁珠法 / 离心柱法提取样本 DNA(血液、尿液、水样、食品、菌落等)。
反应体系配制(N = 样本数 + 1 阴对 + 1 阳对):
2×Probe qPCR 预混液:10μL
引物 - 探针混合液:3μL
模板 DNA:7μL
总体积:20μL / 管
PCR 程序:
预变性:95℃,3min
40 个循环:95℃ 15sec → 60℃ 1min(FAM 通道采集荧光)
结果判读:
阳性:检测通道 Ct 值≤40,且曲线有明显的指数增长曲线;
阴性:样本检测结果 Ct 值>40 或无 Ct 值。
注意事项
仅用于科研用途,禁止临床诊断。
严格分区操作(样本处理、试剂准备、扩增),防止交叉污染。
试剂需避光冰上融化,分装使用,避免反复冻融。
阳性对照最后添加,防止污染。
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文献和实验粪肠球菌(EF)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
基因芯片技术具有快速多样、微型化和自动化等特点在生物医学领域广泛的应用。但由于其基本原理是基于核酸杂交技术,有着内在的缺陷,实验的敏感性和重复性都存在一定问题。核酸杂交较适合于检测基因的表达,不易检测基因组DNA的基因的重排,突变和缺失。而大多数肿瘤性疾病和一些遗传变异和表型的改变与后者有关。为了解决上述问题,我们将芯片技术与荧光PCR技术相结合,设立设计一种含有大量微反应池的PCR基因芯片,以期能快速、准确的对基因的重排,突变和缺失等基因变异进行检测。常规PCR反应产物的检测是电泳后观察获得
。因此,以PCR技术为代表的核酸诊断技术在临床诊断中得到日益广泛的应用。传统的PCR检测模式 传统的PCR检测模式一般需要三个步骤:1.首先需要对待测标本进行处理:通过裂解、纯化,提取标本中的病原体核酸(DNA或RNA)作为PCR扩增的模板;2. 采用PCR或RT-PCR技术对提取到的病原体核酸进行扩增;3.检测PCR扩增产物,检测方法包括凝胶电泳和类似于酶免反应的PCR-ELISA等。实时荧光PCR检测技术 近年来,PCR技术有了重大改进。将传统PCR检测模式中的PCR扩增和检测相结合(即在同一个密闭
探针荧光标记探针的最大优点在于其特异性非常强,避免了非特异性扩增造成的假阳性信号。 匹基生物开发的荧光PCR检测试剂盒主要基于Taqman技术 (TaqmanTM 5-nuclease assay): 除常规的一对引物以外,PCR反应体系中另加有一个能与PCR产物杂交的荧光双标记探针。该探针的5端标记一个荧光基团,3标记另一个荧光基团。此时5端荧光基团吸收能量后将能量转移给临近的3’端荧光淬灭基团(发生FRET),因此正常情况下检测不到该探针5端荧光基团发出的荧光信号。但当溶液中有模板时,模板变性后低温退火时,引物
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