- ￥2800
- 烜雅生物
- XY-PCR411Y
- 国产
- 2026年07月08日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Diagnostic Kit for Clostridiumdifficile tcd-A gene （Real-Time PCR Method）
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50T/盒
艰难梭菌(TCD-A)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
预期用途
本试剂盒适用于检测从水样粪便等标本中分离出的毒素 A 型艰难梭菌，用于艰难梭菌的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。
检验原理
本试剂盒用一对艰难梭菌毒素 A 基因特异性引物，，结合一条特异性荧光探针，用一步法荧光 RT-PCR 技术对艰难梭菌毒素 A 基因进行体外扩增检测，用于科研实验中对可疑感染者的病原学检测。
试剂组成
包装规格 50T/盒
TCD-A 反应液 500μL×2 管
酶液 50μL×1 管
TCD-A 阳性质控品 50μL ×1 管
阴性质控品 250μL ×1 管
储存条件与有效期
储存：‑20℃±5℃避光保存；运输需2～8℃低温。
有效期：12 个月；反复冻融≤5 次。
性能参数
灵敏度：最低检测限1×10³ copies/mL。
特异性：与常见肠道菌无交叉反应，特异性≥99%。
检测时间：约1～2 小时（含样本处理）。
适用仪器
ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
检测流程
样本处理：磁珠法或离心柱法提取粪便核酸，避免交叉污染。
反应体系配制（20μL / 管）：
反应液：19μL
酶液：1μL
混匀后离心，加入5μL待测核酸 / 质控品。
PCR 扩增程序：
预变性：95℃ 2 分钟（1 循环）
扩增：95℃ 15 秒 → 60℃ 30 秒（45 循环，60℃采集FAM 通道荧光）。
结果判读：
阳性：检测通道 Ct 值≤35，且曲线有明显的指数增长曲线；
可疑：检测通道 35
阴性：样本检测结果 Ct 值>38 或无 Ct 值。
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文献和实验艰难梭菌(TCD-A)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
一、反应曲线 首先，我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图，可以划分为四个区：延迟区、等速区、过渡区和平衡区，如下图所示： 二、反应原理 对于延迟区来讲，无规律可寻，对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法，是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时，连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点，并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等，此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
基因芯片技术具有快速多样、微型化和自动化等特点在生物医学领域广泛的应用。但由于其基本原理是基于核酸杂交技术，有着内在的缺陷，实验的敏感性和重复性都存在一定问题。核酸杂交较适合于检测基因的表达，不易检测基因组DNA的基因的重排，突变和缺失。而大多数肿瘤性疾病和一些遗传变异和表型的改变与后者有关。为了解决上述问题，我们将芯片技术与荧光PCR技术相结合，设立设计一种含有大量微反应池的PCR基因芯片，以期能快速、准确的对基因的重排，突变和缺失等基因变异进行检测。常规PCR反应产物的检测是电泳后观察获得
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