副溶血性弧菌(VP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)

副溶血性弧菌(VP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)

基本信息
产品名称：副溶血性弧菌（VP）核酸检测试剂盒（荧光 PCR 法）
英文名称：Diagnostic Kit for Vibrio parahaemolyticus DNA（Real-Time PCR Method）
包装规格：50 测试 / 盒
用途：本试剂盒适用于检测水样粪便，疑似污染的水、食物等样本中的副溶血性弧菌，用于副溶血性弧菌感染   的辅助诊断，其检测结果仅供参考。

检测原理
本试剂盒用一对副溶血性弧菌特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光 PCR 技术对副溶血性弧菌的
DNA 进行体外扩增检测，用于科研实验中对可疑感染者的病原学检测。

试剂盒组成
包装规格    50T/盒
VP 反应液    500μL×2 管
酶液    50μL×1 管
VP 阳性质控品    50μL ×1 管
阴性质控品    250μL ×1 管

性能指标
灵敏度：10² CFU/mL或10¹ copies/μL
特异性：与其他弧菌（霍乱、创伤弧菌）及常见致病菌无交叉反应
重复性：Ct 值变异系数（CV）≤2%
线性范围：10¹–10⁶ copies/μL，R²≥0.99

样本类型与处理
适用样本：鱼虾、贝类、养殖水、食品、饲料、粪便、拭子
处理流程：
增菌液 / 组织匀浆 1 mL，6000 rpm 离心 5 min，弃上清
沉淀加 30–50 μL 裂解液，99℃加热 10 min
12000 rpm 离心 5 min，上清即为模板 DNA

PCR 反应体系（25 μL）
2×PCR 反应液：20 μL
模板 DNA / 对照：5 μL

扩增程序（FAM 通道）
UNG 处理：37℃，2 min，1 循环
预变性：95℃，3 min，1 循环
扩增：95℃ 5 s → 55℃ 40 s（采集荧光），40 循环

结果判定
阳性：检测通道 Ct 值≤35，且曲线有明显的指数增长曲线；
可疑：检测通道 35
阴性：样本检测结果 Ct 值>38 或无 Ct 值。

储存与有效期
储存：-20℃避光，避免反复冻融（≤7 次）
有效期：12 个月
运输：冰袋 / 干冰低温运输

适用仪器
ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、MJ Opticon2、LightCycler480、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR检测仪。