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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
武汉恩玑生命科技有限公司
- 细胞形态:
上皮样
- 运输方式:
活细胞:常温运输; 冻存管:干冰运输
- 生长状态:
贴壁细胞
- 规格:
1*10^6/1*10^6
| 规格: | 1*10^6 | 产品价格: | ¥5000.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 1*10^6 | 产品价格: | ¥10000.0 |
TP53基因敲除细胞系
293T细胞TP53基因敲除细胞株 定制化
细胞信息
基因信息
敲除验证数据
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文献和实验实验原理 TP53 是重要的抑癌基因。在多种肿瘤中都能发现 TP53 基因突变及功能丧失。我们将针对 TP53 基因设计的靶点构建到 pCas9/gRNA1 载体,转染 293T 细胞,构建了 TP53 基因敲除 293T 细胞系。 1、本实验基因敲除原理:pCas9/gRNA1 载体表达 gRNA 和 Cas9 蛋白。将靶点序列克隆到 pCas9/gRNA1 载体上,gRNA 将诱导 Cas9 蛋白对靶点 DNA 进行切割,造成 DNA 断裂。细胞通过邻端连接
【原创】基因组编辑三大工具ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9筛选基因敲除细胞系阳性克隆Protocol
,在各方面数据及对照做足的情况下,给科学进步确实带来了很大帮助。 2. 做过癌细胞株染色体相关的工作的科学家一定看过或者一定知道癌基因组的Variety是非常大的,很多时候对门实验室养的Hela细胞或者293T细胞和自己养的情况都不一定一样。染色体的各种缺失、多拷贝、异位、反转等等情况时有发现及发生,也不断在癌化当中。 3. 针对2中的考虑,如果我们所研究的基因恰恰与癌细胞株的种种变异相关上,在此癌细胞株上做基因敲除就会有各种风险,土豪们需要额外注意选择一个合适的细胞系可能很关键。 4. 所感兴趣基因
之降解,是在 RNA 水平上的降低目的基因的表达。此时,基因敲除稳转株可以很大程度上规避这个问题。因为基因敲除稳转株是在基因组水平上通过基因序列的改变使其基因功能丧失,在敲除细胞中通常不会检测到靶蛋白的表达,而且敲除效果稳定,不能恢复,也就是永久性敲除了。但是基因敲除稳转株缺点是操作周期长,费用多,效率低。如何选择基因下调表达的方式,就要综合考虑了。那么同样是稳定株,单克隆?混合克隆?要怎么选?细胞:当需要去除细胞群体干扰因素的时候,推荐使用单克隆稳定细胞株,其基因组背景相对单一,对实验
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