对虾黄头病病毒(YHV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)

对虾黄头病病毒(YHV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)

产品基本信息
通用名称：对虾黄头病病毒(YHV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
英文名称：Yellow Head Disease Virus Detection Kit (Real-Time PCR Method)
包装规格：50T / 盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融
有效期：12 个月
适用仪器：ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。

预期用途
虾黄头病（YHD）是由虾黄头病毒（Yellow Head Virus, YHV）引起的严重威胁虾养殖的疫病，其感染广发、致死率高，是 OIE 规定的需上报的水生动物疫病。目前仅有斑节对虾和南美白对虾有大规模 YHD 报道，但日本对虾、白对虾、南极磷虾等也能自然感染 YHV。YHV 属于黄头症候群病毒，目前该群病毒有 6 个已知的基因型，YHV 是黄头病的唯一病原。YHD 爆发时，患病虾停止摄食，集聚于池边或水表游动，濒死虾外表发白，头胸甲因肝胰腺变黄呈现黄色。
本试剂盒适用于检测的对虾样品等标本中对虾黄头病病毒 RNA，适用于对虾黄头病病毒感染的辅助诊断。

检验原理
本试剂盒对对虾黄头病病毒基因设计特异性引物探针，用一步法荧光 RT-PCR 技术对对虾黄头病病毒 RNA 进行体外扩增检测，用于科研实验中对可疑感染者的病原学检测。

主要组成成分
名    称    规    格
酶液    50μL×1 管
YHV 反应液    500μL×2 管
YHV 阳性质控品    50μL×1 管
阴性质控品    250μL×1 管

技术参数
检测方法：一步法 RT-PCR（反转录 + 扩增同步完成）
灵敏度：最低可检测1拷贝/μL病毒 RNA
特异性：与白斑综合征病毒（WSSV）、传染性皮下和造血组织坏死病毒（IHHNV）等无交叉反应
线性范围：10²–10⁵ copies / 反应，R²>0.99
检测时长：45 分钟内完成扩增（含 RT 步骤）

操作流程（简化版）
试剂准备：4℃融化试剂，配制反应体系（预混液 16 μL + 引物探针 4 μL，共 20 μL / 测试）；
样本处理：取对虾鳃 / 肝胰腺组织，提取总 RNA；
加样：20 μL 反应液 + 5 μL 模板（样本 / 阴 / 阳性对照），终体积 25 μL；
PCR 扩增：
50℃ 5 min（反转录）；
95℃ 3 min（预变性）；
95℃ 10 sec → 60℃ 30 sec（45 个循环，60℃采集 FAM 荧光）；
结果判读：
阳性：检测通道 Ct 值≤35，且曲线有明显的指数增长曲线；
可疑：检测通道 35
≤38，且曲线有明显的增长曲线，判定为阳性，否则为阴性； 阴性：样本检测结果 Ct 值>38 或无 Ct 值。

产品特点
快速高效：一步法 RT-PCR，45 分钟出结果，减少操作污染；
高灵敏特异：靶向保守基因，特异性强、灵敏度高，可检测早期感染样本；
质控完善：含阴 / 阳性对照，内置内参（IC），监控 PCR 抑制，避免假阴性；
适用性广：兼容多种荧光 PCR 仪，适配对虾、水体、底泥、饲料等多类型样本。

注意事项
试剂盒仅用于科研，不可用于临床治疗；
严格分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），防止交叉污染；
试剂避免反复冻融，融化后充分混匀再使用；
阳性对照为灭活病毒，仍需按生物安全规范处理。