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- HL10693
- 2026年07月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
1022
- 供应商：
上海哈灵
- 检测范围：
科研实验
- 检测方法：
酶联免疫法/ELISA法
- 应用：
仅供科研，不用于临床
- 标记物：
详见说明书
- 样本：
血清，血浆，细胞，组织，体液等
价格：电议
规格：96T/48T
特异性：人Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)ELISA试剂盒说明书可同时检测天然或重组的，且与其他相关蛋白无交叉反应。
保存温度：2-8℃，有效期6个月
说明书：随货发送或直接联系销售人员索取
库存：现货（因销量原因会有变动具体情况与销售人员联系）
ELISA试剂盒标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在、第二孔中分别加标准品100μl，然后在、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为240μg/L，160μg/L ，80μg/L，40μg/L， 20μg/L）。
ELISA试剂盒操作步骤:
1.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
2.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
3.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
4.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
5.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
6.温育：操作同3。
7.洗涤：操作同5。
8.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
9.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
10.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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文献和实验Ⅳ型超敏反应机制 经典的迟发型超敏反应可由结核杆菌皮内注射而诱发。如果宿主曾经接触过结核杆菌，就会在24-72h后出现一个由T细胞介导的局部炎症反应。抗原接种大约4h之后，中性粒细胞在注射部位开始迅速聚集，血管内皮细胞也显示出一系列的形态和功能变化，包括生物合成的增加，细胞器合成的加速，并且发生血浆大分子的渗漏。血纤蛋白原(hbrin。gen)从血液渗透进入周围组织。纤维沉积和部分T细胞及单核细胞聚集，使注射部位的血管外组织形成肿胀和硬结。作为DTH的一个
复合物Ⅳ又称细胞色素c氧化酶(cytochrome c oxidase)。总相对分子质量为200kDa。复合物Ⅳ是以二聚体的形式存在，它的亚基Ⅰ和Ⅱ都含有4个氧化还原中心(redox-active centers)和两个a型细胞色素(含有1个a、1个a3)和两个Cu。主要功能是将电子从细胞色素c传递给O2 分子, 生成H2O∶4cyt c2 O2 4H → 4cyt c3 2H2O。每传递一对电子,要从线粒体基质中摄取4个质子,其中两个质子用于水的形成,另两个质子被跨膜转运到膜间隙
靶细胞时，还会释放出各种淋巴因子，引起单核细胞浸润为主的炎症变化，甚至坏死。主要病变是以单核细胞为主、由溶菌酶类引起的组织坏死。除接触性皮炎和某些自身免疫性疾病外，其他Ⅳ型变态反应都无个体差异。Ⅳ型变态反应的发病机理与细胞免疫反应基本相同，两者同时并存。由此可见，当致敏T细胞与相应抗原结合、发生反应后，对机体有有利的一面（细胞免疫的免疫防护作用），也有有害的一面（Ⅳ型变态反应）。一般来讲，正常的细胞免疫反应既能局限和排除病原微生物，又不致造成组织的严重损伤。若反应过于强烈，超过正常，则会造成
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