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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
RT,常温避光
- 英文名:
Notoginsenoside R2
- 库存:
1013
- 供应商:
上海哈灵生物科技有限公司
- CAS号:
80418-25-3
【产品规格】HPLC≥98% 10mg/支
对照品与标准品的常见问题?
对照品或标准品混用,即将对照品或标准品用于不是其标定方法的含量测定,是药品检验中经常出现但未引起重视的一个问题[3]。尽管同一批对照品不同标定方法的含量有很好的相关性,但并不相同,有时差别会很大。如英国Glaxo公司提供的头孢呋肟酯对照品,HPLC标定为96.9%,供含量测定用;UV为98.8%,供溶出度测定。虽然中国药典凡例明确规定卫生部所发对照品仅用于正文中所规定的分析方法。但由于:
(1)卫生部提供的对照品使用说明书不够详尽,大多无对照品质量要求及标定方法;
(2)对对照品或标准品的正确使用缺乏认识;
(3)日常科研中极难找到相应的对照品;
(4)中国药典正文中也常存在对照品混用的问题,如常将含量测定用的标准品或对照品用于溶出度检查,而含量测定方法与溶出度分析方法又不同,故极易引起混用。
备注:
1、 我司所提供的一切产品,均为科研试剂和化工生产,仅供科研和实验用,不得用于注射、食用或其他用途,我司不做对产品使用的保证(包括但不限于对适销性、适用性等其他相应权利的所有保证)或我司产品可以达到特定的结果或不会有错误的保证。
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文献和实验操作)2. 制备 BCA 工作液(具体操作按说明书进行)3. 将各个稀释浓度的蛋白质标准品和待测蛋白质样品加入到微孔板或试管中,分别加入 BCA 工作液(比例参照试剂盒说明书)混匀。4. 密封后,37℃ 保温 30-60 min5. 冷却到室温,以空白为对照,测量样品在 562nm 或该波长附近的吸光值6. 将各个标准品和待测蛋白质样品在 562nm 处的吸光值减去空白标准品在 562nm 处的平均吸光值。浓度计算步骤1. 输入相对应的标准曲线值和相应的蛋白样品值。(图中所示均为举例
% 是扩增效率,Eff%= 10(-1/slope)-1,一般建议扩增效率在 90%-110% 之间。R2 是用来衡量拟合曲线和单个数据点之间相关性的参数,一般建议在 0.99 以上。 然而,看似简单的实验,做起来却会遇到各种各样的情况,经常有客户咨询标准曲线实验相关的问题。今天,小编就通过几个案例来给大家介绍一下标准曲线结果异常的几个常见原因,内容涉及实验操作和软件设置,希望能对大家的实验有所帮助。 案例 1:标准曲线的趋势不对 在这个案例中,低浓度的标准品稀释液对应的 Ct 值比较小,而高浓度
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稀释 Slope ~ -3.3 R2 > 0.99 精密度 至少 3 个重复 标准差 除了这些因素,还必须评估和验证合适的实验对照(如无模板对照,无 反转录酶对照等)以及模板质量。 3. Real-time qPCR 定量方法 可以分绝对定量和相对定量。绝对定量是用一系列已知浓度的标准品制作标准曲线,在相同的条件下目的基因测得的荧光信号量同标准曲线进行比较,从而得到目的基因的量。该标准品可以是纯化的质粒 DNA,体外转录的 RNA,或者是体外合成的 ssDNA。相对定量可以分比较 Ct 法
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