人白血病T细胞/人 T细胞受体β可变区9 & 荧光素酶标记

Bruton酪氨酸激酶与X性联无丙球血症

X性联无丙种球蛋白血症(X-linked agammagl，bulinemia，XLA)是临床上首次确定的体液免疫缺陷病，由Brutor于1952年报道，故又称Bruton病。XLA作为常见的原发性免疫缺陷病之一，特点为血清中各类免疫球蛋白缺乏，或只能测得微量的抗体。外周血和淋巴组织中B细胞减少或完全缺乏，淋巴结中无生发中心和浆细胞。本病起病早，在出生数月后当患儿体内的母源性抗体水平下降时开始发病。临床表现为反复化脓性感染，患者细胞免疫功能不受影响(部分患者有T细胞数量减少)，主要缺陷

【求助】请问将含荧光素酶报告基因的质粒转染到真核细胞中，建立稳定的细胞系，用哪种转染方法比较好？中间有什么细节是值得注意的

lsdcfhyj 请教前辈，将含荧光素酶报告基因的质粒转染到真核细胞中，建立稳定的细胞系，用哪种转染方法比较好？中间有什么细节是值得注意的 chenjing198345 如果lab经费充裕的话可以用试剂盒包装慢病毒，然后感染真核细胞，完全按照protocol做就行，没啥特别的，sbi的kit不错。如果经费有限，一般是用磷酸钙转染法，这种方法在《分子克隆》里面有介绍，缓冲液的ph值很关键。 lsdcfhyj

双荧光素酶报告基因测试

球蛋白基因重链可变区域的分枝点和3-受体剪切位点组成。供体和受体剪切位点、分枝点的序列均作了改变以匹配最适剪切位点的共有序列。在Rluc的紧上游是T7启动子序列，可在体外合成海洋腔肠荧光素酶的转录物。Rluc的下游是SV40晚期poly A 序列， 提供有效的转录终止和mRNA多腺苷酸化。载体含有原核的复制起始区和β-内酰胺酶基因，可在大肠杆菌中选择质粒的扩增。图8 用Passive Lysis Buffer 制备细胞裂解物中萤火虫和Renilla荧光素酶的稳定性。用pGL3-Control 和pRL