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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
Diagnostic Kit for Carp Edema Virus (Real-Time PCR Method)
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50T/盒
鲤浮肿病毒(CEV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
基本信息
产品名称:鲤浮肿病毒(CEV)核酸检测试剂盒(荧光 PCR 法)
英文名称:Diagnostic Kit for Carp Edema Virus (Real-Time PCR Method)
品牌:烜雅生物
货号:XY-PCR366Y
规格:25T / 盒、50T / 盒
适用样本:鲤 / 锦鲤脾、肾、肝组织,血清,血浆,细胞上清液
储存条件:-20℃避光,避免反复冻融;有效期 12 个月
运输:干冰 / 冰袋低温运输
用途:本试剂盒适用于检测鳜鱼脾、肾等样本中的鲤浮肿病毒 DNA,用于鲤浮肿病毒感染的辅助诊断,其检测结果仅供参考。
检测原理
本试剂盒用一对鲤浮肿病毒的特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光 PCR 技术对鲤浮肿病毒的核酸进行体外扩增检测,用于科研实验中对可疑感染病料的病原学检测。
试剂盒组分
包装规格 25T/盒 50T/盒
CEV 反应液 500μL×1 管 500μL×2 管
酶液 25μL×1 管 50μL×1 管
CEV 阳性质控品 50μL ×1 管 50μL ×1 管
阴性质控品 250μL ×1 管 250μL ×1 管
操作流程
样本处理:取组织 / 血清,磁珠法或离心柱法提取 DNA。
试剂配制:按 N = 样本数 + 1 阳 + 1 阴 + 10% 冗余,每管取19μL 反应液 + 1μL 酶液,混匀分装。
加样:每管加5μL 模板 / 对照,短暂离心。
PCR 扩增:
预变性:95℃,2min(1 循环)
扩增:95℃ 15sec→60℃ 30sec(45 循环,60℃收集 FAM 荧光)
结果判读:
阴性质控品:无特异性扩增曲线或无 Ct 值显示;
阳性质控品:扩增曲线有明显指数增长期,且 Ct 值≤32;
以上条件应同时满足,否则实验视为无效。
性能指标
特异性:与锦鲤疱疹病毒(KHV)、鲤春病毒血症病毒(SVCV)等无交叉反应。
灵敏度:检测限≤15 拷贝 /μL(约 5–10 拷贝 / 反应)。
重复性:组内 / 组间 CV<3%。
线性范围:10¹–10⁸拷贝 /μL,R²≥0.99。
适用仪器
ABI7500、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
注意事项
实验分区(样本制备 / 配液 / 扩增),防气溶胶污染。
冰上操作,试剂避光;不同批号不可混用。
扩增后严禁开盖,密封丢弃防污染。
结果仅供科研,不作为唯一判据。
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文献和实验鲤浮肿病毒(CEV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
基因芯片技术具有快速多样、微型化和自动化等特点在生物医学领域广泛的应用。但由于其基本原理是基于核酸杂交技术,有着内在的缺陷,实验的敏感性和重复性都存在一定问题。核酸杂交较适合于检测基因的表达,不易检测基因组DNA的基因的重排,突变和缺失。而大多数肿瘤性疾病和一些遗传变异和表型的改变与后者有关。为了解决上述问题,我们将芯片技术与荧光PCR技术相结合,设立设计一种含有大量微反应池的PCR基因芯片,以期能快速、准确的对基因的重排,突变和缺失等基因变异进行检测。常规PCR反应产物的检测是电泳后观察获得
探针荧光标记探针的最大优点在于其特异性非常强,避免了非特异性扩增造成的假阳性信号。 匹基生物开发的荧光PCR检测试剂盒主要基于Taqman技术 (TaqmanTM 5-nuclease assay): 除常规的一对引物以外,PCR反应体系中另加有一个能与PCR产物杂交的荧光双标记探针。该探针的5端标记一个荧光基团,3标记另一个荧光基团。此时5端荧光基团吸收能量后将能量转移给临近的3’端荧光淬灭基团(发生FRET),因此正常情况下检测不到该探针5端荧光基团发出的荧光信号。但当溶液中有模板时,模板变性后低温退火时,引物
LightCycler通过实时荧光PCR技术进行DNA甲基化分析
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