瘟病毒属（Pestivirus）核酸检出试剂盒（荧光PCR法

瘟病毒属（Pestivirus）核酸检出试剂盒（荧光PCR法）

品牌：烜雅生物（XY-PCR336Y）
规格：25T/盒、50T / 盒
用途：本试剂盒适用于检测拭血液样本和组织脏器中瘟病毒属类病毒（牛病毒性腹泻病毒、猪瘟病毒和羊边界病毒等）RNA，适用于瘟病毒属类病毒感染的诊断、检疫、检测、监测和流行病学调查等。

产品原理与组成
原理：本试剂盒根据瘟病毒属类病毒基因高度保守区域设计的特异性引物和荧光探针，用一步法荧光 RT-PCR 技术对瘟病毒属类病毒 RNA 进行体外扩增检测，用于科研实验中对可疑感染病料的病原学检测。
组分：
包装规格    25T/盒    50T/盒
Pestivirus 反应液    500μL×1 管    500μL×2 管
酶液    25μL×1 管    50μL×1 管
Pestivirus 阳性质控品    250μL ×1 管    250μL ×1 管
内标质控    25μL×1 管    50μL×1 管
阴性质控品    250μL ×1 管    250μL ×1 管

核心性能指标
灵敏度：最低检测限 **≤1000 拷贝 /mL**
特异性：与蓝耳病、圆环病毒、口蹄疫等无交叉反应
重复性：批内 / 批间CV≤5%
检测时长：约 1.5 小时（含扩增）
适用仪器：ABI7500、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。

样本类型与保存
适用样本：
血液：EDTA 抗凝血（忌肝素）
组织：淋巴结、脾脏、肝脏、肾脏等
其他：拭子、细胞培养物
保存运输：
短期：2–8℃ ≤24 小时
长期：≤-70℃，冻融 ≤3 次

操作流程（25μL 体系）
样本处理：组织 50–100mg 按 1:5 加 DEPC 水匀浆，3000g×15min 取上清；血液直接提取核酸。
反应液配制（20μL）：
Pestivirus 反应液：18μL
酶液：1μL
内标质控：1μL
加样：取5μL 核酸 / 阳 / 阴性对照加入反应管，混匀离心。
扩增程序：
反转录：50℃×10min（1 循环）
预变性：95℃×2min（1 循环）
扩增（45 循环）：95℃×15sec → 60℃×30sec（收集 FAM/VIC 荧光）
结果判定：
FAM 通道为瘟病毒属检测结果，VIC 通道为内标检测结果阳性：检测通道 Ct 值≤40，且曲线有明显的指数增长曲线； 阴性：样本检测结果无 Ct 值，且无特异性扩增曲线；
可疑：样本检测结果 40＜Ct 值≤45，建议重复检测，如果检测通道仍为 40

注意事项
分区操作（样本处理 / 试剂配制 / 扩增），防交叉污染。
试剂 **-20℃±5℃避光保存，有效期12 个月 **；避免反复冻融。
仅供科研使用，不用于临床诊断。