- ￥1500 - 2200
- 抚生
- 0.75ng/ml-48ng/ml
- 0.375ng/ml
- A104940
- 国产
- 2026年07月06日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海抚生
- 库存：
20
- 灵敏度：
0.375ng/ml
- 样本：
血清，血浆，细胞培养上清及其他生物学样本
- 标记物：
血清/血浆
- 适应物种：
大鼠、小鼠、人、植物
- 应用：
ELISA试剂盒
- 检测方法：
ELISA法
- 检测范围：
0.75ng/ml-48ng/ml
- 规格：
48T/96T
| 规格： | 48T | 产品价格： | ￥1500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 96T | 产品价格： | ￥2200.0 |
通过特异性抗小鼠VD3单克隆抗体包被于微孔板，与样本中的VD3结合形成固相抗体复合物。加入HRP标记的检测抗体后，形成抗体-抗原-酶标抗体三明治结构。经洗涤去除未结合物质，加入TMB底物显色，HRP催化TMB转化为蓝色，酸性终止液使颜色变为黄色。颜色深浅与VD3含量成正比，酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品浓度。
性能参数：
产品名称:小鼠维生素D3(VD3)ELISA试剂盒
英文名称:Mouse VD3 ELISA Kit
产品规格：48T/96T
检测样本：血清，血浆，细胞培养上清及其他生物学样本。
检测范围：0.75ng/ml-48ng/ml
灵敏度：0.375ng/ml
特异性：与人其他细胞因子无交叉反应。
有效期：6个月（2-8℃保存）。
检测流程：
1、固相抗体包被
微孔板预先包被一种高特异性的单克隆抗体（捕获抗体），该抗体能专一识别并结合小鼠维生素D3(VD3)中的特定表位。
2、样本加入与抗原结合
将待测样本（如血清、血浆或细胞培养上清）加入微孔中，样本中的VD3会与包被抗体结合，形成“固相抗体-抗原”复合物。未结合的成分在后续洗涤步骤中被清除。
3、酶标二抗结合
加入HRP（辣根过氧化物酶）标记的第二抗体（检测抗体），该抗体识别VD3的另一个独立表位，从而形成“捕获抗体-VD3-检测抗体”的三明治结构。
4、显色反应
洗涤去除未结合的酶标抗体后，加入TMB底物溶液。HRP催化TMB产生蓝色产物，在酸性终止液（如硫酸）作用下变为黄色。
5、定量分析
使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），颜色深浅与样本中VD3浓度呈正相关。
数据及参考曲线：
| 校准品浓度(ng/mL) | 48.00 | 24.00 | 12.00 | 6.00 | 3.00 | 1.50 | 0.75 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.723 | 1.609 | 0.782 | 0.497 | 0.326 | 0.172 | 0.094 | 0.046 |
| 校正OD值 | 2.676 | 1.563 | 0.736 | 0.451 | 0.280 | 0.126 | 0.047 | 0.000 |
一.试剂准备
将试剂盒平衡至室温（20-25℃），浓缩洗涤液按 1:20 稀释备用。
标准品按说明书进行梯度稀释，配制系列浓度标准曲线溶液。
二.实验流程
加样：设置空白孔、标准孔、待测样品孔，空白孔仅加稀释液，其余孔分别加入标准品或待测样品，37℃孵育。
加酶标抗体：除空白孔外，每孔加入酶标抗体，轻轻混匀，37℃避光孵育。
洗涤：弃去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后甩干，重复洗涤 4-5 次，最后拍干残留液体。
显色：每孔加入 TMB 显色液，37℃避光孵育，孔内呈现蓝色。
终止：每孔加入终止液，混匀后颜色由蓝色转为黄色。
检测：在 450nm 波长下测定各孔 OD 值，15 分钟内完成读数。
三.关键提示
实验全程严格控温，孵育时使用封板膜避免蒸发。
洗涤需充分，否则易造成高背景、结果偏差。
显色液需避光，终止顺序与加样顺序保持一致，确保充分混匀。
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