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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
Detection Kit for vesicular stomatitis virus (Real-Time PCR Method)
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50T/盒
水泡性口炎病毒(VSV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
基本信息
产品名称:水泡性口炎病毒(VSV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
检测方法:一步法荧光定量 RT-PCR(探针法 / 染料法)
包装规格:50T / 盒(T = 测试次数)
储存条件:-20℃±5℃避光,避免反复冻融(≤5 次)
有效期:12 个月
适用仪器:ABI7500、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
预期用途
本试剂盒适用于检测口腔、蹄冠上的水泡上皮组织、水泡液、血液、口腔分泌物和组织等标本中的水泡性 口炎病毒 RNA,适用于水泡性口炎病毒感染的辅助诊断及流行病学调查,其检测结果仅供参考。
检测原理
本试剂盒用一对水泡性口炎病毒特异性引物,结合一条特异性荧光探针,用一步法荧光 RT-PCR 技术对水泡性口炎病毒 RNA 进行体外扩增检测,用于科研实验中对可疑感染病料的病原学检测。
试剂盒组分
包装规格 25T/盒 50T/盒
VSV 反应液 500μL×1 管 500μL×2 管
酶液 25μL×1 管 50μL×1 管
VSV 阳性质控品 50μL ×1 管 50μL ×1 管
阴性质控品 250μL ×1 管 250μL ×1 管
性能指标
灵敏度:最低可检测10²–10³ 拷贝 / 反应。
特异性:与 ** 口蹄疫病毒(FMDV)、猪水泡病病毒(SVDV)** 等无交叉反应。
重复性:批内 / 批间Ct 值变异系数(CV)≤2%。
线性范围:10²–10⁸拷贝 / 反应,线性相关系数R²≥0.99。
操作流程(20 μL 体系)
样本处理:取水泡液 / 拭子上清或组织匀浆,磁珠法 / 离心柱法提取 RNA。
体系配制:VSV 反应液19 μL + 酶液1 μL,混匀后分装至 PCR 管(20 μL / 管)。
加样:加入5 μL样本 RNA / 阳控 / 阴控,短暂离心。
扩增程序:
逆转录:55℃,10 min
预变性:95℃,3 min
循环(45 次):95℃ 15 s → 60℃ 60 s(FAM 荧光采集)
结果判读:
阳性:检测通道 Ct 值≤40,且曲线有明显的指数增长曲线;
阴性:样本检测结果 Ct 值>40 或无 Ct 值。
注意事项
分区操作:试剂准备、样本处理、扩增区严格分开,防交叉污染。
质控必做:每批次必须设阳控(Ct 18–22)、阴控(无扩增),否则结果无效。
样本要求:新鲜样本优先,-80℃可长期保存,避免反复冻融。
安全防护:样本视为潜在感染性材料,操作需 ** 生物安全二级(BSL-2)** 防护。
产品仅供科研。
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文献和实验水泡性口炎病毒(VSV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
基因芯片技术具有快速多样、微型化和自动化等特点在生物医学领域广泛的应用。但由于其基本原理是基于核酸杂交技术,有着内在的缺陷,实验的敏感性和重复性都存在一定问题。核酸杂交较适合于检测基因的表达,不易检测基因组DNA的基因的重排,突变和缺失。而大多数肿瘤性疾病和一些遗传变异和表型的改变与后者有关。为了解决上述问题,我们将芯片技术与荧光PCR技术相结合,设立设计一种含有大量微反应池的PCR基因芯片,以期能快速、准确的对基因的重排,突变和缺失等基因变异进行检测。常规PCR反应产物的检测是电泳后观察获得
探针荧光标记探针的最大优点在于其特异性非常强,避免了非特异性扩增造成的假阳性信号。 匹基生物开发的荧光PCR检测试剂盒主要基于Taqman技术 (TaqmanTM 5-nuclease assay): 除常规的一对引物以外,PCR反应体系中另加有一个能与PCR产物杂交的荧光双标记探针。该探针的5端标记一个荧光基团,3标记另一个荧光基团。此时5端荧光基团吸收能量后将能量转移给临近的3’端荧光淬灭基团(发生FRET),因此正常情况下检测不到该探针5端荧光基团发出的荧光信号。但当溶液中有模板时,模板变性后低温退火时,引物
LightCycler通过实时荧光PCR技术进行DNA甲基化分析
沉默。启动子超甲基化可导致有关肿瘤演进的重要基因再次沉默,例如那些有关DNA修复、细胞周期调控和凋亡的基因。因此,可以认为DNA甲基化与肿瘤研究密切相关。肿瘤中某些基因的DNA甲基化状态的变化通过其生物学特征反映出来。 因此,评估DNA甲基化的快速高通量方法对研究者和临床医生在诊断、治疗和预后都非常有实用价值[3] 。 当前对于DNA甲基化研究,普遍使用的方法有甲基化特异性PCR,变性高效液相色谱法(DHPLC),联合亚硫酸氢钠限制性内切酶分析法(COBRA)等,这些方法各有优势,但是均存在诸如实
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