- ￥2800
- 烜雅生物
- XY-PCR279Y
- 国产
- 2026年07月02日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Porine Bordetella bronchiseptica Detection Kit（Real-Time PCR Method）
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50T/盒
支气管败血波氏杆菌(Bb)核酸检测试剂盒（荧光PCR法）
基本信息
产品名称：支气管败血波氏杆菌（Bb）核酸检测试剂盒（荧光 PCR 法）
英文名称：Bordetella bronchiseptica（Bb）Nucleic Acid Test Kit（Real-time PCR）
检测原理：TaqMan 荧光探针法，针对 Bb 特异性基因（如 fimA）设计引物与探针；PCR 扩增时探针被 Taq 酶 5'→3' 外切酶活性降解，释放荧光信号，实时监测并定性 / 定量检测。
包装规格：50T / 盒
有效期：12 个月（-20℃避光保存）
适用仪器：ABI 7500、Roche LC480、Bio-Rad CFX96等
产品组成
组分 规格 数量 储存条件
PCR 反应液（含引物 + 探针 + 酶 + dNTPs） 20μL / 管 10 管 -20℃
阳性对照（Bb 质粒） 50μL / 管 1 管 -20℃
阴性对照（无酶水） 50μL / 管 1 管 -20℃
内对照（IPC） 50μL / 管 1 管 -20℃
样本要求
样本类型：犬 / 猫等动物鼻拭子、咽拭子、眼拭子、肺组织、气管分泌物
样本保存：2～8℃≤24h；-20℃≤3 个月；避免反复冻融
样本处理：拭子浸入样本保存液，充分洗脱后取 2μL 上清直接扩增，或提取 DNA 后使用
检测流程
试剂准备：冰上融化试剂，短暂离心；
反应体系（20μL）：
PCR 反应液：10μL
样本 / 对照：2μL
无酶水：8μL
扩增程序：
95℃预变性：2min
95℃变性：3s
55℃退火 + 延伸：15s（40 个循环）
荧光采集：退火阶段收集 FAM（Bb）、Cy5（内对照）信号
结果判读：
阳性：FAM 通道 Ct≤37，且有典型扩增曲线；内对照 Ct 正常（≤37）
阴性：FAM 通道无 Ct 或 Ct>37；内对照 Ct 正常
无效：内对照无 Ct 或 Ct>37，需重测
性能指标
灵敏度：最低检出限 **≤10 拷贝 / 反应 **；95% 检出限（LoD95）=16 拷贝 / 反应
特异性：与百日咳波氏杆菌、副百日咳波氏杆菌、大肠杆菌、支原体等无交叉反应
精密度：批内 / 批间 Ct 变异系数（CV）≤2%
抗干扰：血红蛋白、胆红素、甘油等常见抑制剂不影响结果
注意事项
全程无菌操作，避免气溶胶污染；使用无粉手套、滤芯枪头
试剂避免反复冻融，融化后 2～8℃≤7 天
阳性对照单独区域操作，防止交叉污染
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文献和实验支气管败血波氏杆菌(Bb)核酸检测试剂盒（荧光PCR法）
%A4.ppt 5 gene cloning and gene expression quantitation by PCR,比较漂亮，对新手挺有用 http://www.dxy.cn/bbs/user/download/502921/pcrcloningandquantitation.pdf 6 核酸的分离与提纯幻灯 http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=1372272&sty=3&keywords=%BB%C3%B5%C6
260nm/O.D280nm能达到1.8左右为标准。分离与提纯过程中保持DNA的完整性和纯度存在许多困难，主要原因有：(1)细胞内存在很高的DNA酶活性，在分离与提纯过程中会造成核酸的降解。(2)DNA分子很大，分离过程中因化学因素或物理因素使DNA降解，如强酸、强碱、温度过高或机械张力剪切等。DNA的定量可采用化学的定磷法、定核酸法。目前多数实验室采用紫外分光光度法测定核酸含量，以下公式可作为紫外定量时参考：双链DNA含量：O.D260nm×样品稀释倍数×50μg/ml=μg/m1样品。器材
resonance（EPR，电子顺磁共振谱）Detection of ROS（活性氧类物质/活性氧）by election paramagnetic resonance（EPR，电子顺磁共振谱）（胰腺组织的ROS生成）。（2） ； ；DCF法： dichlorofluorescein （DCF）二氯荧光黄[1，8，13]活性氧检测试剂盒是利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测的。DCFH-DA本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜，从而使
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