流行性乙型-脑炎病毒(JEV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)

流行性乙型-脑炎病毒(JEV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)

基本信息
产品名称：流行性乙型-脑炎病毒(JEV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
品牌 ：烜雅生物
包装规格：50T
适用仪器：实时荧光定量 PCR 仪（如 ABI 7500、LightCycler 等）
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融；有效期12 个月
检测样本：人血清、脑脊液、全血、脑海马回组织等；也可用于猪等动物样本

预期用途
用于定性/定量检测人或动物样本中流行性乙型-脑炎病毒（JEV）RNA，适用于乙脑感染的早期辅助诊断、流行病学筛查与监测；结果仅供临床参考，需结合症状与其他检查综合判断。

检验原理
采用一步法 TaqMan 探针实时荧光 RT-PCR技术：
针对 JEV 高度保守的NS5 基因设计特异性引物与FAM 标记荧光探针。
样本 RNA 经逆转录生成 cDNA，再进行 PCR 扩增；扩增时探针与模板结合，Taq 酶 5'→3' 外切酶活性切割探针，释放荧光信号。
荧光信号随扩增呈指数增长，仪器实时监测荧光，通过Ct 值判定结果。

试剂盒组分
包装规格    25T/盒    50T/盒
JEV 反应液    500μL×1 管    500μL×2 管
酶液    25μL×1 管    50μL×1 管
JEV 阳性质控品    50μL ×1 管    50μL ×1 管
阴性质控品    250μL ×1 管    250μL ×1 管

技术参数
检测方法：实时荧光 RT-PCR（FAM 通道，530nm）
分析灵敏度：≤10 copies/mL（部分可达 0.95 copies/μL）
线性范围：2×10³～1×10⁸ copies/mL
特异性：与登革热、寨卡、黄热、西尼-罗河病毒等无交叉反应
重复性：Ct 值变异系数（CV）≤2%

推荐反应程序（20μL 体系）
逆转录：42℃，20min（无荧光收集）
预变性：95℃，10min（无荧光收集）
扩增（40 循环）：
94℃，15s（变性，无荧光）
55℃，30s（退火 / 延伸，收集 FAM 荧光）

结果判定
阳性：FAM 通道Ct≤40，且扩增曲线呈典型指数增长
阴性：FAM 通道Ct>40或无 Ct 值，曲线平坦
质控标准：
阴性对照：无扩增或 Ct>40
阳性对照：Ct≤32，曲线正常
否则实验无效，需重做

注意事项
仅用于科研，严禁用于人体注射；结果需结合临床综合判断。
样本采集、转运、储存需规范，避免RNA 降解或交叉污染（易致假阳性）。
试剂需冰上操作，避免酶失活；实验分区（试剂准备 / 样本处理 / 扩增）严格分离。
废弃物按 ** 生物安全二级（BSL-2）** 处理，防止污染环境。

产品优势
快速：全程约2 小时，适合早期诊断。
灵敏：可检出低至 10 copies/mL的病毒核酸。
特异：引物探针针对 JEV 保守区设计，无交叉反应。
便捷：一步法 RT-PCR，无需 separate 逆转录，操作简单。