- ￥1500 - 2200
- 抚生
- 0.39ng/mL-25ng/mL
- 0.195ng/mL
- A100268
- 国产
- 2026年06月30日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海抚生
- 库存：
20
- 灵敏度：
0.195ng/mL
- 样本：
血清，血浆，细胞培养上清及其他生物学样本
- 标记物：
血清/血浆
- 适应物种：
大鼠、小鼠、人、植物
- 应用：
ELISA试剂盒
- 检测方法：
ELISA法
- 检测范围：
0.39ng/mL-25ng/mL
- 规格：
48T/96T
| 规格： | 48T | 产品价格： | ￥1500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 96T | 产品价格： | ￥2200.0 |
通过特异性抗人ITIH4单克隆抗体包被于微孔板，与样本中的ITIH4结合形成固相抗体复合物。加入HRP标记的检测抗体后，形成抗体-抗原-酶标抗体三明治结构。经洗涤去除未结合物质，加入TMB底物显色，HRP催化TMB转化为蓝色，酸性终止液使颜色变为黄色。颜色深浅与ITIH4含量成正比，酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品浓度。
性能参数：
产品名称:人中间α-球蛋白抑制因子H4(ITIH4)ELISA试剂盒
英文名称:Human ITIH4 ELISA Kit
产品规格：48T/96T
检测样本：血清，血浆，细胞培养上清及其他生物学样本。
检测范围：0.39ng/mL-25ng/mL
灵敏度：0.195ng/mL
特异性：与人其他细胞因子无交叉反应。
有效期：6个月（2-8℃保存）。
检测流程：
1、固相抗体包被
微孔板预先包被一种高特异性的单克隆抗体（捕获抗体），该抗体能专一识别并结合人中间α-球蛋白抑制因子H4(ITIH4)中的特定表位。
2、样本加入与抗原结合
将待测样本（如血清、血浆或细胞培养上清）加入微孔中，样本中的ITIH4会与包被抗体结合，形成“固相抗体-抗原”复合物。未结合的成分在后续洗涤步骤中被清除。
3、酶标二抗结合
加入HRP（辣根过氧化物酶）标记的第二抗体（检测抗体），该抗体识别ITIH4的另一个独立表位，从而形成“捕获抗体-ITIH4-检测抗体”的三明治结构。
4、显色反应
洗涤去除未结合的酶标抗体后，加入TMB底物溶液。HRP催化TMB产生蓝色产物，在酸性终止液（如硫酸）作用下变为黄色。
5、定量分析
使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），颜色深浅与样本中ITIH4浓度呈正相关。
数据及参考曲线：
| 校准品浓度(ng/mL) | 25.00 | 12.50 | 6.25 | 3.13 | 1.56 | 0.78 | 0.39 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.692 | 1.593 | 0.834 | 0.496 | 0.327 | 0.165 | 0.101 | 0.031 |
| 校正OD值 | 2.661 | 1.562 | 0.803 | 0.465 | 0.296 | 0.134 | 0.070 | 0.000 |
一.加样孵育
每孔精准加入 100μL 对应标准品 / 待测样本，空白孔加等量样本稀释液；贴封板膜密封微孔板，置于 37℃恒温孵育箱，避光孵育 90min，保证抗原抗体充分结合。
二.首次洗板
轻柔弃去孔内液体，吸水纸上快速拍干；每孔加满洗涤工作液，静置浸泡 30s，甩干拍净；重复洗涤5 次，彻底去除未结合杂质，降低背景值。
三.加酶结合物孵育
除空白孔外，每孔加入 100μL HRP 标记特异性检测抗体；轻微水平晃板混匀，重新封板，37℃避光恒温孵育 60min。
四.二次洗板
重复上述洗板操作 5 次，严格拍干孔内残留液体，杜绝残留洗液造成假阳性、数据偏差。
五.底物显色
避光条件下，每孔加入 90μL TMB 底物显色液，轻柔混匀；37℃避光精准孵育 10~15min，此时液体逐步显现蓝色，显色深浅与待测物含量正相关。
六.反应终止
严格遵循加样顺序，每孔快速加入 50μL 酸性终止液，轻晃微孔板充分混匀，蓝色即刻转为黄色，终止酶促显色反应。
七.上机读数检测
加终止液后15min 内，用酶标仪测定各孔 450nm 波长吸光度（OD 值）；以标准品浓度为横坐标、OD 值为纵坐标绘制标准曲线，拟合方程计算待测样本目标蛋白浓度。
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