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- 文献和实验
- 技术资料
| 名称 | COS-7 非洲绿猴肾细胞SV40转化(种属鉴定) |
| 别名 | Cos-7; COS7; Cos7; CV-1 in Origin Simian-7 |
| 种属 | 猴 |
| 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 培养条件 | DMEM+10% FBS+1% P/S。气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37℃。湿度:70%-80% |
| 推荐传代比例 | 1:3-1:6 |
| 换液频率 | 2-3次/周 |
| 冻存条件 | 冻存液:90% FBS+10% DMSO;温度:液氮 |
| 背景描述 | COS-7细胞源自CV-1细胞,经带有编码野生型T抗原的起始失活突变的SV40转染得到。COS-7细胞含有一个来自SV40基因组全部早期区域的组成型拷贝。 |
| 组织来源 | 肾;SV40转染 |
| 生物安全等级 | BSL-2 |
| 微信扫码咨询客服: 官方微信公众号: |
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文献和实验Vero(非洲绿猴肾细胞)培养指南 Vero细胞由日本千叶大学的Yasumura和Kawakita从正常成年非洲绿猴肾脏建株,1964年带到NIH时已传至第93代,是目前科研中广泛使用的经典细胞系。 细胞特性与应用场景 该细胞应用广泛,可用于Vero毒素检测、绞牛肉中的病毒检测、功效测试、疟疾研究、培养基测试和支原体检测,也是一种合适的转染宿主和疫苗生产常用细胞。 形态特征与生长方式 贴壁生长,呈上皮细胞样(卵圆形或多边形),贴壁依赖性较强,传代时需用胰酶充分消化,一般消化
传代步骤比较传统:倒掉培养液->PBS洗2遍->胰酶0.25%消化->倒掉胰酶->加培养基->用吸管吹打均匀->分瓶->放置37度,5%CO2孵箱。我的体会是:1、消化时间和实验环境温度也有很大关系,我们实验室条件比较差,不能维持恒温(不过我想大部分实验室目前也还是做不到的)。夏天的时候,消化特别快。但是到了冬天,就很慢,要用手捂老半天。2、消化到什么程度可以,经验很重要,如果每瓶消化都要通过显微镜观察来判断,首先效率太低,而且还很容易消化过头。对光观察培养瓶,当感觉到有些泛白,瓶角有少许细胞
问:cos-7的转染1、细胞的培养:我们在培养细胞时发现该细胞长的很快,不到2天的时间就长满了;消化的时候老是成块的掉,如果消化时间加长,细胞也能成单个的,但是细胞的生长力又减弱了,请问要怎样来克服这一问题呢?2、转染前:转染前16-24h我们用含血清不含抗生素的MEM传进6孔盘,16h左右就发现细胞贴壁了,但是形态没有以前好,并且漂死细胞相当多。最初我们都以为是细胞没有贴壁,又把细胞放进培养箱,结果死细胞越来也多,请问是不是因为没有抗生素所以细胞才很容易死,并且形态不好的呢?3、转染:在6孔
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