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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
20
- 供应商:
雅吉生物
- 组织来源:
详见説明
- 物种来源:
人,大鼠,小鼠等
- 细胞形态:
详见説明
- 运输方式:
常温/干冰
- 年限:
理论永久
- 生长状态:
悬浮/贴壁
- 规格:
T25
基因过表达稳转株是指将目的基因整合进宿主细胞的基因组中,使该基因能在细胞内长期且稳定地过量表达,其在基因功能研究、疾病模型的构建、药物筛选、蛋白质生产以及基因治疗等多个领域有着广泛的应用。
本公司专业提供细胞技术服务。细胞质粒基因诱导表达,稳定细胞株pool,单克隆稳定细胞株筛选,药筛基因去除,诱导性表达质粒构建,转基因表达鉴定,包括:基因敲入/敲除,常规基因稳转、Luc1/2,诱导性表达,基因敲入/敲除,常规基因稳转、Luc1/2、诱导性表达,基因原位敲入/敲除,Cre转染、单克隆筛选、药筛基因去除鉴定等。更多细胞技术服务项目周期及报价咨询销售经理

Hela细胞human SLC8B1基因敲除株培养条件
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培养条件 |
空气,95%;CO2,5% ;37℃ |
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生长特性 |
详见説明 |
冻存条件 |
无血清冻存液 |
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细胞背景 |
更新中。。。 |
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传代方法 |
1:2~1:3 |
传代情况 |
2天换液 |
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备注 |
本库的细胞仅用于科研工作,未经许可不得用于其他目的,使用者不得将本库细胞转让给第三者。 |
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Hela细胞human SLC8B1基因敲除株收货后处理
复苏细胞处理方法:培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是运输细胞的最好办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶,严格无菌后将细胞瓶放置培养箱中静置2-4小时以稳定细胞状态。静置后显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(最好40x,100x,200x各一张),前三天照片是重要售后依据,不提供照片默认收到状态良好。
冻存细胞处理方法:收到细胞后,观察泡沫箱中干冰是否有剩余,冻存管是否完好无损是否有解冻情况,若发现干冰完全汽化或冻存管有解冻破损现象,请及时拍照并与我们联系。如果细胞签收三天内未与我们联系,则默认为收货良好。复苏第一管如有活性问题,请及时联系我们,技术人员与您沟通指导后再复苏第二管,未与我方联系擅自复苏第二管出现问题不予售后。
二、如为贴壁细胞,请在显微镜下观察细胞密度:
1. 未超过80%汇合度时,用75%酒精(建议配置75%酒精的水也是灭菌超纯水,喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作;然后打开盖子,先用枪头把培养基吸出10ml左右,放在离心管里,然后瓶口过火(严禁直接倾倒),这样可以保证不污染,再用10ml的移液管,将剩余的培液全部吸出,放于离心管中,培养瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培养16hr(时间根据细胞生长情况调整)之后,传代或者冻存。
2. 超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。具体步骤如下:
1) 弃去培养液,用3ml PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次;
2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培养瓶中,倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来;
3) 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中,按要求分瓶。

三、如为悬浮细胞,吸出培养液,1000转/分钟离心5分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
注意:换液时一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造成生长不好。
四、细胞出现问题,可重发的情况有哪些?判定标准是什么?
(1)细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、破损、漏液等,重发;
(2)冻存的细胞复苏后,绝大多数细胞未存活,重发;
(3)存活的细胞静置24小时后,绝大多数细胞未存活,重发;
(4)冻存的细胞复苏后或存活的细胞静置4小时后并且未开封,出现污染,重发;
(5)视具体情况而定。
五、细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?
(1)客户造成细胞污染,不重发;
(2)客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;
(3)细胞状态不好,未提供细胞培养前3天照片的,不重发;
(4)细胞培养时经其它处理的,不重发;
(5)细胞收到2天内,未告知,不重发;
(6)视具体情况而定。
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文献和实验细胞相比,增殖依然异常迅速。此细胞株被用作"model cancer cells”来研究细胞信号传导(cellular signal transduction)。HeLa细胞株是由正常子宫颈细胞被一种人类乳突状瘤病毒(Human Papillomavirus 18 或HPV18)转型成癌细胞的,而且和正常子宫颈细胞有许多不同。目前已经证实HeLa细胞株难以控制。此细胞株有时会污染同一实验室的其他细胞培养环境(cell culture),进而影响生物研究。由于研究人员很少检查已确立的细胞株的本质和纯粹度
问:我的HeLa的细胞,转了H2BGFP的,已经传了很多代了,慢慢的像是伸出触角一样,起初不是很明显,现在变成这样了。可能是因为什么原因呢?请看图片: 答:Hela细胞在没有加胰岛素的培养基培养下容易形态变化。建议: 1、可能由于血清浓度不够高,导致细胞营养缺失或不良,建议加大血清用量,一般为10%FBS。 2、肿瘤细胞传代次数过多容易影响细胞生长状态,细胞容易分枝生长,建议传代时控制细胞生长密度,而且不要等到细胞长的太满时或多层
相关专题 总有一种转染方法适合你 请问脂质体2000能转染 Hela细胞吗? 答1.应该是可以的,但是脂质体2000的细胞毒性的确比较大,如果细胞比较敏感的话不建议使用。罗氏的FugeneHD细胞毒性比较小,而且效率也高,特别是对原代细胞,肿瘤细胞和干细胞 。悬浮细胞的话还是电转吧。 答2.可以,用脂质体2000转染 Hela细胞,没感觉对Hela细胞毒性大,而且转染效果在70%以上。有过在转染过程中要注意
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