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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
200
- 英文名:
Torque teno sus virus 1 Detection Kit(Real-Time PCR Method)
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50T/盒
猪细环病毒1型(TTSuV1)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
产品概述
产品名称:猪托克特诺病毒 1 型(猪细环病毒 1 型,TTSuV1)荧光定量 PCR 试剂盒
英文名称:Torque Teno Sus Virus Type 1 (TTSuV-1) Real-time PCR Kit
别名:猪细环病毒 1 型核酸检测试剂盒(荧光 PCR 法)
检测原理:针对 TTSuV1 基因组保守区设计特异性引物与荧光探针(染料法或探针法),通过实时荧光 PCR 技术扩增病毒 DNA,监测荧光信号累积,实现定性 / 定量检测。
主要用途:用于猪血清、淋巴结、脾脏、肺脏等组织样本中 TTSuV1 病毒 DNA 的检测,适用于猪群感染筛查、流行病学调查及辅助诊断,仅供科研使用,不可用于临床诊断。
背景:TTSuV1 为无囊膜环状单链 DNA 病毒,常与 PCV2、PRRSV 等混合感染,加重猪群病情,造成养殖业经济损失。
产品规格与组分
25T/盒、50T / 盒
试剂盒组分
包装规格 25T/盒 50T/盒
TTSuV1 反应液 500μL×1 管 500μL×2 管
酶液 25μL×1 管 50μL×1 管
TTSuV1 阳性质控品 50μL ×1 管 50μL ×1 管
阴性质控品 250μL ×1 管 250μL ×1 管
核心性能指标
1. 灵敏度
最低检出限:≤100 拷贝 / 反应
线性范围:10²~10⁷拷贝 / 反应,线性相关系数 R²≥0.99
2. 特异性
引物 / 探针针对 TTSuV1 高度保守区设计,与 TTSuV2、PCV2、PRRSV、猪细小病毒等无交叉反应
3. 准确性
阳性符合率≥98%,阴性符合率≥99%
4. 稳定性
保存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融
保质期:未开封 12 个月,开封后 1 个月内用完
运输条件:干冰低温运输
适用仪器
ABI 7500/QuantStudio 系列
Agilent MX3000P/MX3005P
Bio-Rad CFX96
Roche LightCycler 系列
Eppendorf Mastercycler ep realplex
操作流程(20μL 体系)
1. 样本处理
组织样本:取 20mg 组织,研磨后提取 DNA
血清 / 血浆:取 200μL,提取 DNA
提取后 DNA 可立即使用或 - 20℃保存,避免反复冻融
2. 反应体系配制(冰上操作)
组分 体积
2×qPCR Master Mix 10μL
TTSuV1 Primer/Probe Mix 2μL
模板 DNA(样本 / 对照) 5μL
无菌水 3μL
总体积 20μL
3. PCR 扩增程序
预变性:95℃,30 秒
循环扩增(40 个循环):
变性:95℃,10 秒
退火 / 延伸:58℃,30 秒(收集荧光信号)
4. 结果判读
阳性:Ct 值≤35,且出现典型扩增曲线
阴性:Ct 值 > 35 或无扩增曲线
无效:阴性对照出现扩增曲线或阳性对照无扩增曲线,实验需重做
注意事项
分区操作:严格划分试剂准备区、样本处理区、扩增区,耗材与仪器专用,防止交叉污染。
防污染:使用带滤芯枪头,每次换枪头;阳性对照在生物安全柜中操作。
试剂使用:冰上解冻,轻柔混匀,瞬时离心后使用;避免强光照射试剂。
安全防护:样本视为潜在感染性物质,操作遵守生物安全规范,废弃物高压灭菌处理。
产品优势
高灵敏特异:保守区引物探针设计,检出限低,无交叉反应。
即开即用:预混液体系,操作简便,减少人为误差。
定性定量双用:可定性检测,也可通过标准曲线精确定量。
兼容性强:适配主流荧光 PCR 仪,适配性广。
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文献和实验猪细环病毒1型(TTSuV1)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
基因芯片技术具有快速多样、微型化和自动化等特点在生物医学领域广泛的应用。但由于其基本原理是基于核酸杂交技术,有着内在的缺陷,实验的敏感性和重复性都存在一定问题。核酸杂交较适合于检测基因的表达,不易检测基因组DNA的基因的重排,突变和缺失。而大多数肿瘤性疾病和一些遗传变异和表型的改变与后者有关。为了解决上述问题,我们将芯片技术与荧光PCR技术相结合,设立设计一种含有大量微反应池的PCR基因芯片,以期能快速、准确的对基因的重排,突变和缺失等基因变异进行检测。常规PCR反应产物的检测是电泳后观察获得
探针荧光标记探针的最大优点在于其特异性非常强,避免了非特异性扩增造成的假阳性信号。 匹基生物开发的荧光PCR检测试剂盒主要基于Taqman技术 (TaqmanTM 5-nuclease assay): 除常规的一对引物以外,PCR反应体系中另加有一个能与PCR产物杂交的荧光双标记探针。该探针的5端标记一个荧光基团,3标记另一个荧光基团。此时5端荧光基团吸收能量后将能量转移给临近的3’端荧光淬灭基团(发生FRET),因此正常情况下检测不到该探针5端荧光基团发出的荧光信号。但当溶液中有模板时,模板变性后低温退火时,引物
LightCycler通过实时荧光PCR技术进行DNA甲基化分析
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