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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
200
- 英文名:
Porcine circovirus type 4 Detection Kit
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50T/盒
猪圆环病毒4型(PCV-4)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
基本信息
产品名称:猪圆环病毒 4 型(PCV-4)核酸检测试剂盒(荧光 PCR 法)
英文名称:Porcine circovirus type 4 Detection Kit
货号:XY-PCR165Y
规格:50T / 盒
用途:科研用,用于猪圆环病毒 4 型的病原学检测
样本类型:肺、淋巴结、血液、组织病料等
靶基因:rep 基因(高度保守区)
荧光通道:FAM(检测)、VIC(内标,可选)
试剂盒组分(50T)
2×PCR Master Mix(含 Taq 酶、dNTP、缓冲液、荧光探针 / 引物):1.25 mL × 1 管
PCV-4 引物探针混合液:0.5 mL × 1 管
阴性质控品(无菌水):1 mL × 1 管
阳性质控品(PCV-4 质粒):0.5 mL × 1 管
说明书:1 份
保存与有效期
保存条件:-20℃±5℃,避光,避免反复冻融(≤5 次)
有效期:12 个月
反应体系(25 μL)
2×Master Mix:12.5 μL
引物探针混合液:2.5 μL
模板 DNA:5 μL
无酶水:5 μL
扩增程序(常规)
预变性:95℃,3 min(1 个循环)
扩增:95℃ 15 sec → 60℃ 30 sec(40 个循环,60℃时采集荧光)
性能指标
灵敏度:最低可检出约 2.5 copies/μL
特异性:与 PCV1/2/3、PRV、ASFV、PPV、PRRSV 等无交叉反应
重复性:组内 / 组间 CV<5%
结果判定(FAM 通道)
阳性:Ct ≤40,且有典型 S 型扩增曲线
阴性:无 Ct 值,无扩增曲线
可疑:40<Ct ≤45,建议重复;仍可疑则判阳性
质控标准
阴性对照:无扩增曲线
阳性对照:Ct ≤32,典型扩增曲线
否则实验无效
适用仪器
实时荧光定量 PCR 仪(如 ABI 7500、Bio-Rad CFX 系列等)
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文献和实验猪圆环病毒4型(PCV-4)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
一、反应曲线 首先,我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图,可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,如下图所示: 二、反应原理 对于延迟区来讲,无规律可寻,对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法,是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时,连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点,并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等,此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
基因芯片技术具有快速多样、微型化和自动化等特点在生物医学领域广泛的应用。但由于其基本原理是基于核酸杂交技术,有着内在的缺陷,实验的敏感性和重复性都存在一定问题。核酸杂交较适合于检测基因的表达,不易检测基因组DNA的基因的重排,突变和缺失。而大多数肿瘤性疾病和一些遗传变异和表型的改变与后者有关。为了解决上述问题,我们将芯片技术与荧光PCR技术相结合,设立设计一种含有大量微反应池的PCR基因芯片,以期能快速、准确的对基因的重排,突变和缺失等基因变异进行检测。常规PCR反应产物的检测是电泳后观察获得
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