- ￥1500 - 2200
- 抚生
- 0.312ng/mL-20ng/mL
- 0.156ng/mL
- A114514
- 国产
- 2026年06月26日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海抚生
- 库存：
20
- 灵敏度：
0.156ng/mL
- 样本：
血清，血浆，细胞培养上清及其他生物学样本
- 标记物：
血清/血浆
- 适应物种：
大鼠、小鼠、人、植物
- 应用：
ELISA试剂盒
- 检测方法：
ELISA法
- 检测范围：
0.312ng/mL-20ng/mL
- 规格：
48T/96T
| 规格： | 48T | 产品价格： | ￥1500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 96T | 产品价格： | ￥2200.0 |
通过特异性抗人NSF单克隆抗体包被于微孔板，与样本中的NSF结合形成固相抗体复合物。加入HRP标记的检测抗体后，形成抗体-抗原-酶标抗体三明治结构。经洗涤去除未结合物质，加入TMB底物显色，HRP催化TMB转化为蓝色，酸性终止液使颜色变为黄色。颜色深浅与NSF含量成正比，酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品浓度。
性能参数：
产品名称:人N-乙基马来酰亚胺敏感因子(NSF)ELISA试剂盒
英文名称:Human NSF ELISA Kit
产品规格：48T/96T
检测样本：血清，血浆，细胞培养上清及其他生物学样本。
检测范围：0.312ng/mL-20ng/mL
灵敏度：0.156ng/mL
特异性：与人其他细胞因子无交叉反应。
有效期：6个月（2-8℃保存）。
检测流程：
1、固相抗体包被
微孔板预先包被一种高特异性的单克隆抗体（捕获抗体），该抗体能专一识别并结合人N-乙基马来酰亚胺敏感因子(NSF)中的特定表位。
2、样本加入与抗原结合
将待测样本（如血清、血浆或细胞培养上清）加入微孔中，样本中的NSF会与包被抗体结合，形成“固相抗体-抗原”复合物。未结合的成分在后续洗涤步骤中被清除。
3、酶标二抗结合
加入HRP（辣根过氧化物酶）标记的第二抗体（检测抗体），该抗体识别NSF的另一个独立表位，从而形成“捕获抗体-NSF-检测抗体”的三明治结构。
4、显色反应
洗涤去除未结合的酶标抗体后，加入TMB底物溶液。HRP催化TMB产生蓝色产物，在酸性终止液（如硫酸）作用下变为黄色。
5、定量分析
使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），颜色深浅与样本中NSF浓度呈正相关。
数据及参考曲线：
| 校准品浓度(ng/mL) | 20.00 | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.725 | 1.569 | 0.860 | 0.496 | 0.307 | 0.158 | 0.096 | 0.048 |
| 校正OD值 | 2.678 | 1.521 | 0.812 | 0.448 | 0.260 | 0.110 | 0.049 | 0.000 |
一、试剂准备
所有试剂使用前平衡至室温（18–25℃）；
洗涤液按比例稀释（如10×稀释为1×）；
标准品用稀释液复溶并进行倍比稀释（如0、0.5、1、2、4、8 ng/mL）。
二、加样
设立标准孔、样本孔和空白孔（仅加稀释液）；
每孔加入50 μL标准品或待测样本；
可对血清/血浆样本进行1:2预稀释以减少基质干扰。
三、温育
封板后37℃温育60分钟，使抗原充分结合；
温育期间避免阳光直射。
四、洗涤
弃去孔内液体，每孔注入300–350 μL洗涤液；
静置30秒至1分钟，甩干，重复5次；
拍干微孔板，避免残留液滴影响后续反应。
五、加酶标抗体
每孔加入100 μL生物素化检测抗体；
37℃避光温育60分钟。
六、再次洗涤
同上法洗涤5次，确保彻底清除未结合抗体。
七、加HRP-亲和素
每孔加入100 μL HRP标记亲和素；
37℃避光温育30–60分钟。
八、第三次洗涤
再次洗涤5次，拍干。
九、显色
每孔加入显色剂A和B各50 μL（或TMB单组分90–100 μL）；
37℃避光显色15–30分钟，观察颜色变化。
十、终止反应
每孔加入50 μL终止液，轻轻震荡混匀；
溶液颜色由蓝变黄，立即进行测定。
十一、读数与分析
使用酶标仪在450 nm波长下测定OD值；
以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准曲线；
将样本OD值代入方程，计算TPS浓度。
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