甲型流感病毒N3亚型(IAV-N3)核酸检测试剂盒(荧光PC

甲型流感病毒N3亚型(IAV-N3)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)

基本信息
产品名称：甲型流感病毒 N3 亚型 (IAV-N3) 核酸检测试剂盒 (RT-PCR 荧光探针法)
英文名称：Diagnostic Kit for Influenza A Virus Subtype N3 RNA (RT-PCR Fluorescence Probing)
包装规格：50T / 盒
适用样本：咽拭子、鼻拭子、痰液、支气管肺泡灌洗液、禽类组织 / 泄殖腔拭子等
用途：检测样本中甲型流感病毒 N3 亚型 RNA，用于人 / 禽类 N3 亚型感染辅助检测、流行病学监测、疫情筛查

检验原理
采用一步法实时荧光 RT-PCR技术：
针对 IAV-N3 亚型神经氨酸酶 (N3) 保守基因设计特异性引物与 TaqMan 荧光探针
逆转录酶将病毒 RNA 反转录为 cDNA；
Taq 酶扩增 cDNA，扩增时探针被切割，释放荧光信号；
仪器实时监测荧光，生成扩增曲线，通过 Ct 值判定结果。

试剂组成
组分    规格    数量
IAV-N3 反应液（含引物、探针、dNTP、缓冲液）    1.0 mL    1 管
酶液（RT 酶 + Hot-Start Taq 酶）    50 μL    1 管
IAV-N3 阳性质控品（灭活病毒 / 质粒）    50 μL    1 管
阴性质控品（无酶水）    250 μL    1 管

储存与有效期
保存条件：-20℃±5℃避光，低温运输；避免反复冻融（≤5 次）；
有效期：12 个月（未开封）。

性能指标
灵敏度：最低检测限≤500 拷贝 /mL，可检出低载量病毒
特异性：仅与 IAV-N3 亚型反应，不与甲流其他亚型（H1/H3/H5/H7 等）、乙流及其他呼吸道病毒交叉反应；
精密度：批内 / 批间变异系数 (CV)≤3%；
线性范围：5×10²～5×10⁷拷贝 /mL，相关性 R²≥0.99。

适用仪器
兼容主流实时荧光 PCR 仪：
ABI 7300/7500/StepOnePlus
Bio-Rad CFX96
Roche LightCycler 480
博日、天隆、宏石等国产仪器

操作流程（30μL 体系）
样本处理：提取样本 RNA（磁珠法 / 离心柱法）；
配制反应液：反应液 24μL + 酶液 1μL，混匀离心；
加样：每管加 5μL RNA 模板（样本 / 阳控 / 阴控），离心防气泡；
PCR 程序：
逆转录：50℃，15 min
预变性：95℃，10 min
40 循环：95℃ 15 sec → 60℃ 45 sec（收集荧光）
结果判定：
阳性：Ct≤37（或≤40），S 型扩增曲线；
阴性：无 Ct 或 Ct>40；
无效：阳控无扩增、阴控有扩增（污染 / 试剂失效）。

产品特点
一步法：RT-PCR 单管完成，减少污染、缩短耗时（约 1.5h）；
高特异：N3 保守区设计引物探针，无交叉反应；
高灵敏：可检出极低载量病毒，适合早期感染筛查
质控完善：配套阴阳质控，结果可靠。

注意事项
仅供科研，不用于临床最终诊断；结果需结合流行病学与临床症状综合判断；
严格分区操作（样本处理、PCR 配制、扩增区），防交叉污染；
试剂避光保存，避免反复冻融；不同批号组分不可混用。