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- 2026年06月17日
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2 OD
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文献和实验一般来讲，进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高，所以每个样品至少要做3个平行孔，以防在后面的数据分析中，由于Ct相差较多或者SD太大，无法进行统计分析。通常来讲，反应体系的引物终浓度为100-400mM；模板如果是总RNA一般是10ng-500，如果cDNA，通常情况下是1ul或者1ul的10倍稀释液，要根据目的基因的表达丰度进行调整。当然这些都是经验值，在操作过程中，还需要根据所用
qPCR的数据相对定量分析其实很简单。我做了很多的qPCR实验，也看了很多的资料，包括Nature protocol， AB官方的分析教程，MIQE，甚至包括一些商业化软件使用的教程及教程里面记述的原理。 我在这里跟大家分享一下自己的经验，最常用，最普遍的相对定量方法就是2^-△△Ct法，该法最最简单的说就是： 首先将一次实验的所有基因Ct值整理好，之后用每一组样本自身的目的基因Ct值减去自身内参基因Ct值，得到的数就是△Ct；换成公式就是：△Ct=Ct（目的基因）-Ct（内参
GAPDH抗体|GAPDH抗体大全-艾美捷指导您购买合适的GAPDH抗体
，ProteinTech的GAPDH Monoclonal Antibody（货号60004-1-Ig）则是另一款单克隆抗体，除了WB和IF外，还可以应用于免疫组化IHC等实验。需要注意的是IF也是GAPDH抗体常用的应用类型之一。左图为ProteinTech的GAPDH Monoclonal Antibody（货号60004-1-Ig）抗体在石蜡包埋、福尔马林固定的切片上的应用。 更多GAPDH内参抗体 以及其他如Actin、Tubulin等其他内参抗体，请电话垂询。美国EarthOx品牌是一 家提供高性
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