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- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型:
原代细胞
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 库存:
10
- 生长状态:
贴壁培养
- 运输方式:
视天气状况和运输距离远近
- 细胞形态:
上皮样,不规则细胞
- 物种来源:
大鼠,其他咨询
- 组织来源:
实验动物的正常泪道组织
- 规格:
5*10^5
大鼠原代泪道上皮细胞
泪器包括分泌泪液的泪腺与排泄泪液的泪道。其中,泪道是排泄泪液的通道,由泪点、泪小管、泪囊、鼻泪管组成。
产品信息
产品名称:大鼠原代泪道上皮细胞(Rat Lacrimal Duct Epithelial Cells,RLDEC)
种属:大鼠
组织来源:实验动物的正常泪道组织
细胞类型:上皮原代细胞(非永生细胞、非肿瘤细胞)
货号:XY-yd0842
产品规格
冻存管装:5×10⁵ 活细胞 / 1.8mL 冻存管(干冰运输)
复苏现货:5×10⁵ 细胞 / T25 培养瓶(常温 / 冰袋运输)
细胞形态与生长特性
细胞形态:上皮样不规则多边形,铺路石样集群生长,边界清晰
生长方式:严格贴壁依赖型,建议培养瓶胶原预包被提升贴壁率
增殖周期:倍增稳定,每周传代 2–3 次;1:2 比例分瓶传代
换液周期:每 2–3 天更换一次完全培养基
制备工艺与质控标准
1. 分离纯化流程
麻醉处死大鼠→无菌剥离完整泪道→PBS 冲洗去除血污与结缔组织→胶原酶 + 透明质酸酶复合消化→70μm 筛网过滤→差速贴壁去除成纤维细胞杂细胞→离心收集纯化上皮细胞→梯度降温程序冻存
2. 鉴定指标(随货附检测报告)
标志物鉴定:广谱角蛋白 PCK 免疫荧光染色阳性,上皮细胞纯度≥90%
微生物检测:支原体、细菌、真菌、酵母菌全阴性;无 HBV/HCV/HIV 污染
活率标准:冻存复苏后细胞活率≥85%
内毒素:细胞悬液内毒素<10EU/mL,无热源干扰实验 培养基特点
低血清配方,含上皮特异性生长因子,维持泪道上皮屏障功能、抑制成纤维细胞过度增殖;pH 稳定 7.2–7.4,适配 5% CO₂培养环境;未开封有效期 6 个月,配好完全培养基 4℃可存放 2 个月标准培养操作条件
温度:37℃恒温
气相:95% 空气 + 5% CO₂
湿度:培养箱 70%–80% 饱和湿度
冻存液配方:90% 特级 FBS + 10% DMSO;也可使用商品化无血清程序冻存液
传代消化:0.25% 胰酶 - EDTA 短时消化,避免上皮损伤
运输、保存与有效期
1. 运输方式
冻存细胞:干冰全程冷链运输;到货后不可置于 - 20℃,尽快转入液氮
复苏活细胞:冰袋保温箱运输,收到后立即放入培养箱静置 2–4h 稳定
2. 储存条件
长期保存:液氮罐(-196℃),有效期 12 个月
临时存放:-80℃冰箱可短期存放≤30 天,禁止反复冻融
3. 产品有效期
液氮冻存:12 个月;复苏培养细胞仅建议使用至 P2 代,P3 代后上皮表型易丢失
使用限制声明
仅限体外科学研究,严禁用于临床诊断、动物 / 人体治疗、体内给药实验
不可传代至 P3 代以上,高代次细胞上皮特性丢失、杂细胞增多
细胞废弃物需按生物安全二级材料规范灭菌处理
随货配套资料
细胞完整操作说明书(复苏、传代、冻存、鉴定流程)
支原体、微生物阴性检测报告
PCK 免疫荧光纯度鉴定报告
专用培养基配制指南
细胞镜下形态参考图
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文献和实验大鼠原代泪道上皮细胞
本人把大鼠原代肾小管上皮细胞的取材、培养方法进行了总 结,请分享! 取材:1.肾小管节段的分离(机械网筛滤过法): ①取 Wistar 大鼠断颈法处死,立即置入碘伏液中浸泡 5 分钟。 ②将大鼠转移入超净工作台,取腰部切口迅速取出肾脏,置于盛有生理盐水的培养皿中清洗并除去包膜和肾蒂组织。 ③取皮质置于80目筛网上,剪碎成1-2mm3大小组织块,网下放盛有少量生理盐水的培养皿。 ④用玻璃注射器内芯于80目网上充分研磨组织。 ⑤收集 80 目网下液体转移至 100
原代肠道上皮细胞是研究肠道屏障功能、药物吸收代谢、炎症损伤、病原感染等的重要实验材料。但新手上手很容易踩坑:取材后细胞大量死亡、成纤维细胞过度生长污染、培养数天后快速分化失去上皮表型。 本文梳理了从取材、隐窝分离、上皮纯化、二维培养到表型鉴定的全流程操作,同时一并总结了活力提升、纯度控制、表型维持的核心实操要点。 全流程总览图 一、实验前准备 1. 实验动物 常用 6~8 周龄 SPF 级 C57BL/6 小鼠,雌雄均可。同一批实验建议统一周龄、性别和取材肠段,减少
PriCells-原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长,既有上皮样细胞又有纤维样细胞,纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等。混杂的细胞会直接影响实验结果。在体外培养原代细胞时,为了保证实验结果的可靠性、一致性、稳定性、和可重复性,要求采用单一种类细胞来进行实验,这样才能对某一细胞的功能、形态等变化进行一系列研究,因而培养细胞的纯化就成为实验研究的重要一步,甚至需要从混杂的细胞群中分离出单个细胞来进行培养和开展实验研究。一、原代
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