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- ScienCell
- 中国/美国
- XY-XB-1308
- 2025年07月30日
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- 英文名：
Human Corneal Epithelial Cells
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100
- 细胞类型：
科研
- 品系：
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- 组织来源：
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- 物种来源：
鼠/人/其它
- 细胞形态：
上皮样/成纤维样/其它
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- 运输方式：
常温运输/干冰运输
- 年限：
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- 生长状态：
贴壁/悬浮
人角膜上皮细胞(HCEpiC)细胞简介
【产品来源】 细胞主要来源ATCC、ScienCell、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系
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二、细胞收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液移入废液缸中，原瓶（T25瓶）保留6-8ml完全培养液，悬浮细胞需离心处理，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤。
三、细胞培养步骤
- 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中，加入约6ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
2、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，进行离心收集，1000RPM条件下离心5分钟，去除上清，按冻存数量加入血清及DMSO，冻存比例为90%FBS+10%DMSO。
注意：
我细胞库认为购买细胞的客户有培养细胞的经验，客户收到细胞后，严格按照本细胞培养条件更换完全培养基。如果因为客户缺少基本的细胞培养知识或培养条件而导致细胞各类问题，我库概不负责。对于因缺少细胞培养知识和时间，建议客户可联系我细胞库代为培养细胞和后续相关实验。
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文献和实验实验材料： 1. 正常人角膜移植供体角膜 2. 胰蛋白酶/EDTA液：0.05%胰蛋白酶，0.5mmol/L EDTA 3. KGM：无血清角质形成细胞培养液，添加0.15mmol/L 钙、0.1ng/ml 人上皮生长因子、5mg/ml 胰岛素、0.5mg/ml 氢化可的松和30mg/ml 牛垂体提取物；MEM；PBSA；胎牛血清 4. FNC：10mg/ml 纤连蛋白、35ug/ml 胶原蛋白和100mg/ml BSA（bovine serum albumin）。BSA
实验材料：1. 完整的人角膜；2. GMF-Saline G；3. 中性蛋白酶Ⅱ，1.2U/ml（用DMEM/F12/GASP稀释2.4U中性蛋白酶Ⅱ）；4. 胰蛋白酶/EDTA；5. DMEM/F12/GASP；6. DEME/F12/2FB/GASP：DMEM/F12/GASP含2%FBS；7. CMF/GASP；8. LSC培养基；9. 弯虹膜剪，11cm（4-3/8in）；10. Jeweler’s镊，10cm（4in）；11. 角膜剪，19mm刃，尖头；12. Colibri缝纫钳
柱状上皮主要被覆于鼻腔、鼻咽、支气管树、胃肠、子宫颈管、子宫内膜及输卵管等部位。柱状上皮脱落细胞主要包括涂片纤毛柱状细胞、粘液柱状细胞和储备细胞。 （1）纤毛柱状细胞：细胞呈锥形，顶端宽平，其表面有密集的纤毛，纤毛巴氏染色呈亮红色；胞质泡沫状，巴氏染色染蓝色，HE染淡红色；核圆形位于细胞中部，染色质细颗粒状。在涂片中的常见排列形式： 1）蜂房状排列：细胞成群或呈片医学教育|网搜集整理，排列紧密，不重叠。 2）栅栏状：细胞紧密排列，医学教育|网搜集整理可有重叠
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