- ￥1500 - 2200
- 抚生
- 0.125ng/mL-8ng/mL
- 0.0625ng/mL
- A117654
- 国产
- 2026年06月04日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海抚生
- 库存：
20
- 灵敏度：
0.0625ng/mL
- 样本：
血清，血浆，细胞培养上清及其他生物学样本
- 标记物：
血清/血浆
- 适应物种：
大鼠、小鼠、人、植物
- 应用：
ELISA试剂盒
- 检测方法：
ELISA法
- 检测范围：
0.125ng/mL-8ng/mL
- 规格：
48T/96T
| 规格： | 48T | 产品价格： | ￥1500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 96T | 产品价格： | ￥2200.0 |
通过特异性抗小鼠KLHIgM单克隆抗体包被于微孔板，与样本中的KLHIgM结合形成固相抗体复合物。加入HRP标记的检测抗体后，形成抗体-抗原-酶标抗体三明治结构。经洗涤去除未结合物质，加入TMB底物显色，HRP催化TMB转化为蓝色，酸性终止液使颜色变为黄色。颜色深浅与KLHIgM含量成正比，酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品浓度。
性能参数：
产品名称:小鼠抗血蓝蛋白IgM抗体(KLHIgM)ELISA试剂盒
英文名称:Mouse KLHIgM ELISA Kit
产品规格：48T/96T
检测样本：血清，血浆，细胞培养上清及其他生物学样本。
检测范围：0.125ng/ml-8ng/ml
灵敏度：0.0625ng/ml
特异性：与人其他细胞因子无交叉反应。
有效期：6个月（2-8℃保存）。
检测流程：
1、固相抗体包被
微孔板预先包被一种高特异性的单克隆抗体（捕获抗体），该抗体能专一识别并结合小鼠抗血蓝蛋白IgM抗体(KLHIgM)中的特定表位。
2、样本加入与抗原结合
将待测样本（如血清、血浆或细胞培养上清）加入微孔中，样本中的KLHIgM会与包被抗体结合，形成“固相抗体-抗原”复合物。未结合的成分在后续洗涤步骤中被清除。
3、酶标二抗结合
加入HRP（辣根过氧化物酶）标记的第二抗体（检测抗体），该抗体识别KLHIgM的另一个独立表位，从而形成“捕获抗体-KLHIgM-检测抗体”的三明治结构。
4、显色反应
洗涤去除未结合的酶标抗体后，加入TMB底物溶液。HRP催化TMB产生蓝色产物，在酸性终止液（如硫酸）作用下变为黄色。
5、定量分析
使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），颜色深浅与样本中KLHIgM浓度呈正相关。
数据及参考曲线：
| 校准品浓度(ng/ml) | 8.00 | 4.00 | 2.00 | 1.00 | 0.50 | 0.25 | 0.13 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.743 | 1.612 | 0.867 | 0.495 | 0.335 | 0.168 | 0.101 | 0.056 |
| 校正OD值 | 2.686 | 1.556 | 0.811 | 0.438 | 0.279 | 0.112 | 0.045 | 0.000 |
操作步骤：
1.试剂平衡试剂盒室温平衡 30 min；浓缩洗涤液按说明书稀释混匀。
2.设孔加样设空白、标准品、待测样品孔，精准加样，封板。
3.温育结合37℃孵育 30–60 min，弃液拍干。
4.洗板加满洗涤液浸泡，甩干拍干，重复3–5 次。
5.加酶结合物除空白孔外每孔加 HRP 标记液，封板 37℃孵育。
6.再次洗板充分洗净未结合游离酶，控干残留液体。
7.显色避光加显色液 A/B，避光 37℃显色 10–15 min。
8.终止读数加终止液变色稳定后，立刻酶标仪读 OD 值。
9.结果计算标准曲线拟合，换算样本浓度。
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文献和实验于阴性反应。如抗原为高纯度的，可直接包被固相。如抗原中会有干扰物质，直接包被不易成功，可采用捕获包被法，即先包被与固相抗原相应的抗体，然后加入抗原，形成固相抗原。洗涤除去抗原中的杂质，然后再加标本和酶标抗体进行竞争结合反应。竞争法测抗体有多种模式，可将标本和酶标抗体与固相抗原竞争结合，抗HBc ELISA一般采用此法。另一种模式为将标本与抗原一起加入到固相抗体中进行竞争结合，洗涤后再加入酶标抗体，与结合在固相上的抗原反应。抗HBe的检测一般采用此方法。 5.竞争法测抗原 小分子抗原或半抗原因缺乏
抗体的结构 抗体是能与抗原特异性结合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig 分五类，即 IgG、IgA、IgM、IgD 和 IgE。与免疫测定有关的 Ig 主要为 IgG 和 IgM。Ig 由两个轻链（L）和两个重链（H）的单体组成。Ig 的轻链是相同的，有 κ（kappa）和 λ（Lambda）两种型别。五类 Ig 的重链结构不同，这决定了它们的抗原性也不同。IgG 和 IgM 的重链分别称为 γ（gamma）链和 μ（mu ）链。 重链和轻链的 N 端的氨基酸排列顺序
入酶标抗体，与结合在固相上的抗原反应。抗HBe的检测一般采用此法。 （五） 竞争法测抗原 小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点，因此不能用双抗体夹心法进行测定，可以采用竞争法模式。其原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。标本中抗原量含量愈多，结合在固相上的酶标抗原愈少，最后的显色也愈浅。小分子激素、药物等ELISA测定多用此法。 （六） 捕获包被法测抗体（经典方法） IgM抗体的检测用于传染病的早期诊断中。间接法ELISA一般仅适用于检测总抗体或IgG抗体
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