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- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型:
原代细胞
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 库存:
14
- 英文名:
Hippocampal Neurons Cells
- 生长状态:
贴壁培养
- 运输方式:
视天气状况和运输距离远近
- 细胞形态:
不规则细胞
- 物种来源:
小鼠,其他咨询
- 组织来源:
实验动物的正常脑组织
- 规格:
5*10^5
小鼠原代海马神经元细胞
海马体主要负责记忆和学习,日常生活中的短期记忆都储存在海马体中。
神经元是构成神经系统结构和功能的基本单位。神经元具有长突起,由细胞体和细胞突起构成。
产品基础信息
1. 产品全称
小鼠原代海马神经元细胞(Mouse Primary Hippocampal Neurons)
货号:XY-yd0501(烜雅生物)
2. 取材来源
胚胎:E16.5~E18.5 孕鼠胚胎海马脑组织;少数取材出生 24h 内乳鼠海马
常用品系:C57BL/6、ICR/CD1 小鼠
取材部位:大脑边缘系统海马区组织,机械分离 + 胰酶消化制备 P0 原代细胞细胞生物学特性
分化属性:终末高度分化细胞,无增殖能力、严禁传代扩增,P0 代一次性使用
生长方式:贴壁生长,需多聚赖氨酸 (PLL 0.1mg/mL) 提前包被培养器皿才能正常贴壁伸展
形态特征:胞体卵圆形 / 不规则,培养 3~5d 伸出轴突、树突,7~10d 形成神经网络突触结构
纯度质控
标志物:NSE、Tuj-1 (βⅢ-tubulin) 免疫荧光阳性,神经元纯度≥90%;GFAP(星形胶质)污染<10%
微生物:无细菌、真菌、支原体、病毒(HBV/HCV/HIV)污染,每批次附质检 COA 报告
细胞活率:活细胞出货活力≥90%;冻存复苏存活率≥85%
标准体外培养体系
1. 培养环境
37℃、5% CO₂、饱和湿度 70%~80% 细胞培养箱
2. 专用培养基
Neurobasal+B27 体系
Neurobasal 基础液 + 2% B27 添加剂 + 0.5mM L - 谷氨酰胺 + 双抗(青霉素 / 链霉素),无血清培养
DMEM/F12 基础体系:DMEM/F12+5% 胎牛血清 + 神经添加剂(备选)
关键:接种后第 3 天可加入终浓度 5μM 阿糖胞苷 (Ara-C),抑制杂细胞增殖,进一步提升神经元纯度
3. 接种密度与换液
接种:2~4×10⁴ cells/cm²;24 孔板:6×10⁴/ 孔、6cm 皿:4×10⁵/ 皿
换液:接种 24h 首次半换液,后续每 2~3d 半量换液,不整瓶弃液
实验窗口期:接种后7~14d 为最佳实验周期(突触发育成熟),超 20d 细胞逐步凋亡
产品应用方向(科研专用,禁止临床)
神经发育研究:神经元分化、轴突 / 树突生长、突触发生机制、神经发生 (Neurogenesis)
神经疾病模型:阿尔茨海默 AD、癫痫、脑缺血缺氧、帕金森体外细胞模型构建
药理 & 毒理筛选:神经保护药物、神经毒性化合物、中药单体药效筛选、钙离子成像实验
分子机制:神经递质分泌、离子通道、电生理膜片钳、基因过表达 / 敲除功能验证、信号通路研究
储运与保存说明
活细胞瓶装:常温快递运输;收到后即刻放入 37℃培养箱静置 4~6h,再换液实验;室温不可放置>12h
冻存管细胞:干冰签收,立即转入 - 80℃短期存放(≤30d)或液氮长期保存;严禁 4℃/ 常温存放冻存细胞
冻存液配方:90% FBS+10% DMSO
产品合规备注
本产品仅限科研体外实验使用,不可用于活体动物注射、人临床诊断与治疗,符合国内细胞科研试剂管控标准。
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文献和实验小鼠原代海马神经元细胞
Hippocampal Neuron Cultures (and mixed cortical cultures) Submitted by: Jean Siao, Ph.D. Begin by timing the pregnant mouse at E17-E19 days of gestation. Have ready the following: 1. Cold Hank’s balanced salt solution 2. 1x trypsin
rpm离心5 min,倾去上清,用DMEM/F12培养液重悬细胞,轻轻吹打,台盼蓝染色快速计数,根据计数结果,调整细胞终浓度为1 00000个/ml,加入终浓度为10%胎牛血清后接种于培养瓶(板)中,置于37 ℃、含5% CO2培养箱中培养;12小时内禁止晃动 6、换液:接种后24 h将培养液全量换成无血清DMEM/F12培养液,第48 h时加入终浓度为10 μmol/L的阿糖胞苷,以抑制非神经元细胞的过度生长,随后每3 d半量换液。 此外,原代培养的海马组织由多种细胞构成,如成纤维细胞
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