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蛋白A(Protein A) 残留检测试剂盒, DDM141

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  • ¥2680 - 4358
  • Seebio已认证
  • DDM1416A
  • 国产
  • 2026年05月19日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 库存

      10

    • 保质期

      1年

    • 供应商

      西宝生物400-021-8158

    • 保存条件

      2-8度

    • 规格

      48T/96T

    规格:48T产品价格:¥2680.0
    规格:96T产品价格:¥4358.0

    蛋白A(Protein A) 残留检测试剂盒

    • 别名:残留蛋白A检测试剂盒 Protein A ELISA kit 蛋白A(Protein A) 残留检测试剂盒
    • 编码:DDM1416A
    • 简介:抗体类药物生产时多用到的蛋白A(Protein A)亲和层析填料,不可避免会有蛋白A配基脱落,导致抗体药物中蛋白A的残留污染。本试剂盒既可检测天然的protein A,也可检测重组的protein A如MabSelect SuRe等,适用于定量分析生物药物中蛋白A杂质。

     

    基础信息

    灵敏度 LOD 10pg/ml, LOQ 10pg/ml
    线性 在[10-3000]pg/mL的测量范围内,r≥0.9900
    回收率 80%-120%
    批间差 ≤10%
    特异性 既可检测天然的protein A,也可检测重组的protein A
    应用 适用于定量分析生物药物中蛋白A杂质
     

    产品介绍

    简介
    抗体类药物生产时多用到的蛋白A(Protein A)亲和层析填料,不可避免会有蛋白A配基脱落,导致抗体药物中蛋白A的残留污染。本试剂盒既可检测天然的protein A,也可检测重组的protein A如MabSelect SuRe等,适用于定量分析生物药物中蛋白A杂质。
    产品细节图片1
    优势
    通常情况下,蛋白A会与待测样品中的单克隆抗体形成复合体从而影响准确的蛋白A测定,与传统方法相比,本试剂盒无需样品预处理步骤,即可检测从IgG中分离的蛋白A,实验简单易操作,且耗时短。
    实验原理
    本试剂盒应用双抗体夹心酶联免疫检测技术测定样品中proteinA的含量。包括校准品,标准品,稀释液,
    Biotin标记的检测抗体,清洗液,双组分TMB显色液,终止液,预包被酶标板,封板膜。
     
    使用方法
    试剂准备
    1.本试剂对水份敏感,在开瓶前,需将各组分小瓶平衡至室温,以避免容器内的水份冷凝。
    2.清洗液的配制:用蒸馏水或纯化水10倍(1:9)稀释试剂E 清洗液(10X),配制实验用清洗液。长期使用可放于2℃~8℃保存,效期3个月。
    3.设置酶标仪,读取波长450nm/630nm的双波长。
    4.显色液的配制:双组份TMB显色液由两部分组成:组分A(含H2O2)和组分B(含TMB),分瓶包装,临用前按1:1混合后使用。
    5.校准品的配制:检测含有天然或重组Protein A样品时,请参照下表稀释步骤配制出标准曲线:3000.00pg/mL、1500.00pg/mL、800.00pg/mL、320.00pg/mL、128.00pg/mL、51.20pg/mL 、20.48pg/mL、0.00pg/mL。
    校准品名称
    移取
    加入至
    配成重组Protein A浓度
    浓溶液
    10μL的3μg/mL试剂A校准品
    990μL的试剂B稀释液,混匀
    30ng/mL
    校准品H
    40μL的30ng/mL校准品
    360μL的试剂B稀释液,混匀
    3000.00pg/mL
    校准品G
    200μL的校准品H
    200μL的试剂B稀释液,混匀
    1500.00pg/mL
    校准品F
    200μL的校准品G
    175μL的试剂B稀释液,混匀
    800.00pg/mL
    校准品E
    150μL的校准品F
    225μL的试剂B稀释液,混匀
    320.00pg/mL
    校准品D
    150μL的校准品E
    225μL的试剂B稀释液,混匀
    128.00pg/mL
    校准品C
    150μL的校准品D
    225μL的试剂B稀释液,混匀
    51.20pg/mL
    校准品B
    150μL的校准品C
    225μL的试剂B稀释液,混匀
    20.48pg/mL
    校准品A
    150μL的试剂B稀释液
     
    0.00pg/mL
    6.样品的配制: 
    通常情况下,Protein A会与待测样品中的抗体形成复合体,而高浓度IgG会影响检测结果,从而影响Protein A的准确测定。因此在测定Protein A之前应当进行样品稀释。推荐用试剂B稀释液,将样品稀释至0.1-1.0mg/mL的蛋白浓度,可尝试将样品10-50倍稀释,或稀释至检测线性范围的浓度进行检测,稀释完的样品体积应不少于150μL。
     
    未提供的必需品
    1.具有450nm和630nm双波长检测功能的酶标仪。 (如果酶标仪不能提供双波长分析,也可以仅在450nm波长下读取)。
    2.移液器5-200μLg
    3.多通道移液器100μL。
    4.蒸馏水或纯化水。
    5.用于稀释清洗液的500mL容器。
    检测操作步骤
    1.取所需数量的组份H预包被酶标板条固定于板架上;向孔中加入校准品/待测样品,每孔50μL,每个浓度两个重复;
    2.轻轻震荡混匀,贴上组份I封板膜,20-25℃振荡(500rpm)孵育60分钟;
    3.洗板:甩净孔中液体,在各反应孔中加入稀释后的实验用清洗液(由试剂E清洗液稀释后配制),每孔300μL,停留5秒钟后甩去孔中液体,重复3次,最后一次甩净拍干。机洗:每孔中注液量为每孔300μL,洗板3次,最后一次拍干;
    4.加入试剂C Biotin标记的检测抗体,每孔100μL;
    5.轻轻震荡混匀,贴上组份I封板膜,20-25℃振荡(500rpm)孵育60分钟;
    6.洗板:甩净孔中液体,在各反应孔中加入稀释后的实验用清洗液(由试剂E清洗液稀释后配制),每孔300μL,停留5秒钟后甩去孔中液体,重复3次,最后一次甩净拍干。机洗:每孔中注液量为每孔300μL,洗板3次,最后一次拍干;
    7.加入试剂D链霉亲和素-辣根过氧化物酶复合物,每孔100μL;
    8.轻轻震荡混匀,贴上组份I封板膜,20-25℃振荡(500rpm)孵育30分钟;
    9.洗板:甩净孔中液体,在各反应孔中加入稀释后的实验用清洗液(由试剂E清洗液稀释后配制)每孔300μL,停留5秒钟后甩去孔中液体,重复3次,最后一次甩净拍干。机洗:每孔中注液量为每孔300μL,洗板3次,最后一次拍干;
    10.显色:加入试剂F显色液,每孔100μL,20-25℃,避光孵育8分钟;
    11.终止:加入试剂G终止液,每孔100μL,终止反应(此时蓝色立刻转为黄色);
    12.测定:用酶标仪在450nm/630nm双波长下,读取各孔的吸光值(O.D.值),如果酶标仪不提供双波长分析,可以仅在450nm波长下读取,测定应在加入终止液后15分钟以内进行。
     
    结果分析与计算
    1.校准品、待测样品均做2个重复,取其平均值。
    2.用酶标仪的自带软件(通常是四参数逻辑曲线拟合)或使用能够生成四参数逻辑拟合(log-4PL)的计算机软件制作校准品剂量-反应曲线的回归方程,再根据待测样品的O.D.值从回归曲线上返算出样品中待测物的浓度。
    3.请勿使用线性回归分析来推导样品浓度,避免导致结果不准。
    4.含有大于3000pg/mL的Protein A样品需用所提供的试剂B稀释液稀释后测定。计算结果时,需将稀释后的样品浓度乘以稀释倍数。

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    图标文献和实验
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