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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 保质期:
1年
- 供应商:
福建荷瑞生物科技有限公司
- 保存条件:
4℃保存
- 规格:
5×1 mL
产品信息
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产品名称 |
产品编号 |
规格 |
价格(元) |
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2×RNA loading buffer(Denatured) 2×RNA上样缓冲液(变性) |
HRF1058 |
5×1 mL |
180.00 |
产品描述
2×RNA上样缓冲液(变性)适用于变性的RNA凝胶电泳,能促使RNA样品沉入凝胶加样孔中。缓冲液组分经过优化,主要成份为SDS,EDTA,溴酚蓝,二甲苯青和去离子甲酰胺,无Rnase污染。溴酚蓝和二甲苯青用作电泳时的指示剂,可指示电泳进程。
2×RNA上样缓冲液(变性)包括的各组分:95%去离子甲酰胺、0.025%(w/v) Xylene Cyanol FF、0.025%(w/v) Bromophenol Blue、5mM EDTA(pH8.0)、0.025%(w/v)SDS等。
运输与保存方法
室温运输。4℃可保存12个月,-20℃可长期保存。
使用方法
1)请按每1微升RNA样品加入1微升2×RNA Loading Buffer上的比例(2倍稀释)来使用。
2)混匀后稍离心,在65-70℃加热5-10分钟,速冷后加样到凝胶加样孔中,电泳。
染料迁移速率(1.2%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳)
二甲苯青FF:与5000 bp的RNA的迁移率相当
溴酚蓝:与500bp的RNA的迁移率相当
注意事项
1)产品开封后,应进行适当分装,于-20℃保存,以避免污染。
2)请使用无RNase的溶液、微量离心管及枪头等,以防止RNA降解。
3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4)本产品仅作科研用途!
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文献和实验RNA的完整性可以通过琼脂糖变性电泳分析检测,而含量则通过紫外分光光度计确定。常见的变性电泳有甲醛变性电泳,戊二醛变性电泳等。甲醛变性电泳检测RNA完整性一、材料、试剂和仪器1 材料: 植物总RNA 5-10μg2 试剂:1)加样运载缓冲液(Loading buffer),50% 甘油,1mmol/L EDTA (pH 8.0),0.25%溴酚蓝,25%二甲苯氰FF2)10×TAE Buffer3)5×甲醛凝胶电泳缓冲液:,0.1mol/L MOPs (pH7.0),40mmol/L乙酸
更换此电泳缓冲液。6、1.2%的甲醛变性胶:称0.4克琼脂糖,加入3.34 ml 10×FA gel buffer,加入30 ml DEPC水,微波炉融化,肉眼观察无颗粒状悬浮物。冷却至约50-60℃,再加入600 l甲醛,倒入7.5×5.0 cm的凝胶模具中。插入合适长度和宽度的梳子,室温放置约30min后即可使用。三、实验方法一般取0.3 g的总RNA,加入1/5体积的5×加样缓冲液,65℃加热5 min,冰上骤冷,以消除RNA的二级结构。建议上样前在RNA样品中加入0.5-1.0 ul的溴化
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