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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
现货
- 英文名:
Immunohistochemistry (IHC) Rapid Antibody Diluent (Blocking-Free)
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 保存条件:
2-8°C储存;低温运输
- 规格:
I1523003-10ml
中文名:免疫组化 (IHC) 快速孵育抗体稀释液 (免封闭)
英文名:Immunohistochemistry (IHC) Rapid Antibody Diluent (Blocking-Free)
纯度:适用于免疫荧光(IF),BioReagent,无菌,IHC
货号:I1523003
存储温度:2-8°C储存
运输条件:低温运输
稳定性存储:Store at 2-8°C long term (12 months).
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文献和实验决定簇。通过抗原修复,使得细胞内抗原决定族重新暴露,提高抗原检测率。常用的修复方法从强到弱一般分为三种,高压加热修复、微波修复、胰酶修复。其中高压加热修复这一方法简便易操作,效果也更好。使用高压加热修复对于修复温度和时间的把握十分重要,温度越高修复时间越短,温度与修复时间呈负相关。修复结束后注意室温冷却,让蛋白自然复性。其次,尽量使用过量的抗原修复液,防止高温液体挥发干涸,对切片造成不可逆的损伤。 灭活内源性过氧化物酶和生物素 在传统的 ABC 法和 SP 法中,免疫组化反应容易受到内源性过氧化物酶和生物
不完全:使用正常山羊血清或 1%~5% BSA 封闭 1h。 (5)离子相互作用造成的背景:降低抗体稀释液的离子强度。 (6)切片或细胞过于干燥或孵育温度过高:实验过程中请保持切片处于湿润状态,一抗孵育时尽量使用 4℃ 过夜孵育。 (7)内源性过氧化物酶残余:适度延长内源性过氧化物酶阻断剂阻断时间。 (8)样本于缓冲液或抗原修复液中浸泡太久:样本在溶液中浸泡时间不要超过 24h。 Q4:为什么会出现非特异性染色,如何避免? (1)抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加非特异性染色:由于本试剂盒使用
免疫组化背景深、特异性差?IHC Troubleshooting 指南
免疫组化最常见的翻车并不是“完全没颜色”,而是该染的位置不突出,不该染的位置却一片棕。背景深、定位混乱、边缘颜色重、阴性组织也有信号,都可能影响结果判读。 排查这类问题,可以顺着实验流程往前找:固定和切片 → 抗原修复 → 内源性酶封闭 → 一抗/二抗 → 洗涤 → DAB显色。 一、先判断:到底是哪种“背景高”? 如果整张切片均匀发棕,优先检查抗体浓度、内源性过氧化物酶和DAB显色时间;如果组织边缘明显比中心深,多见于孵育过程中切片干片;如果只有某些非目标细胞强阳性,需要
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