SDS-PAGE类梯度凝胶一步法配制试剂盒（10-250 k

【牌 号】JF0170
【英文名称】SDS-PAGE gradient gel one-step preparation kit
【规 格】试用装规格 10gels，60 gels，125 gels（0.75mm 胶）
【产品组成】

【产品简介】
        本试剂盒提供一步法配制 SDS-PAGE 类梯度凝胶所需全部试剂，用户只需自备制胶器具和蒸馏水，即可便捷完成具有梯度分离效果的下层胶与上层胶的连续灌注，无需液封，操作高效。
特点：
         无需优选浓度，单次灌胶即可有效分离 10–250 kDa 广泛分子量范围的蛋白；
         采用 A 液、B 液加等比例稀释液 X 的 3 试剂模式，简化类梯度凝胶配制流程；
         预添加替代物，无挥发异味，操作更安全；
         电泳后蛋白条带清晰、锐利，大小分子均获良好分离；
         含快速电泳液干粉，全面提升实验效率。

【保存】
        2~8°C 保存，有效期 12 个月；SDS-PAGE 快速电泳液干粉可常温保存，有效期 36 个月。
        APS 改良型促凝剂粉末需现用现配：每支加 1 mL 蒸馏水配成 10%溶液，-20℃可保存 2 个月，4℃限 2 周内使用；
【使用方法】
1、选择浓度：本试剂盒配制的梯度凝胶可有效分离 10-250 kDa 分子量范围的蛋白，无需根据蛋白分子量预先选择凝胶浓度。传统凝胶浓度与分离范围对应关系可参考【参考附表 1】。
2、配置工作液：
         将所有试剂恢复至室温；
         根据目标凝胶厚度及配制体积，按照【参考附表 2】取所需体积下层胶 A 液和上层胶 B 液；
         向 A 液和 B 液中分别加入等体积的稀释液 X，混匀；
         向上一步的两种混合液中分别加入 10% APS 改良型促凝剂溶液（加入比例为 1:100），充分混匀。
3、灌胶：
         先将混合好的下层胶工作液（A 液+X 液+APS）注入制胶玻璃板中；
         紧随其后，缓慢加入上层胶工作液（B 液+X 液+APS），使其与下层胶自然形成梯度过渡界面，不需额外液封；
           注：灌胶时需缓慢操作，防止两层凝胶混合。若操作不熟练，可在灌注完下层胶后，用乙醇或纯水进行液封，待下层胶凝固后再配置并灌注上层胶。
         轻轻插入梳齿，避免气泡；待胶凝固后（约 20 min），拔取梳齿即可用于电泳。
4、电泳：
         配置电泳液：取一袋粉末，加入 1L 去离子水或者蒸馏水，充分溶解后即可。 推荐电泳条件：推荐 150V-250V 恒压电泳，25-45 分钟即可完成电泳，适用于 Mini-PROTEAN 等常规模块胶系统。
           注：回收的电泳液可重复使用 1-2 次。如观察到导电性下降或条带弥散，应更换新鲜电泳液。为取得最佳的电泳效果，请新鲜配置。 【注意事项】
         本试剂盒适用于 0.75/1.0/1.5 mm 厚度凝胶，约可配制 60–125 块（0.75 mm）。
           
       注：以上数据基于伯乐(Bio-Rad) Mini-PROTEAN 等标准制胶器计算，实际数量可能因具体操作、仪器型号及实验习惯略有浮动。
        溶液中如有极少量漂浮物属正常现象，摇匀后可正常使用。
        使用前所有试剂需恢复至室温。推荐在 22–25°C 环境下操作，凝胶通常在 20 分钟左右凝固。配合本公司快速电泳液（JF7414），从配胶到转膜完成仅需约 1.5 小时。
        下层胶与上层胶工作液的体积比推荐为 2:5，也可根据实际分离需求尝试 3:4 等其他比例。
        部分品牌电泳仪使用过程中会产生热量，可适当调低电压进行电泳。
        插入梳子时请缓慢操作，避免气泡影响上样孔成型。
        本品仅供科研使用，严禁用于临床、食品、药品等领域。
        为了您的安全和健康，操作时请穿戴实验服、手套等防护用具。避免与皮肤、眼睛接触，若误触需立即用水冲洗。

【参考附表 1】
                           传统凝胶浓度与分离范围对应关系图

【参考附表 2】