人支气管上皮细胞；BEAS-2B(提供STR鉴定报告)

正常人支气管上皮细胞培养

实验材料： 1. 手术切除的含支气管的正常肺组织 2. 胰蛋白酶/EDTA液：0.05%胰蛋白酶，0.5mmol/L EDTA 3. 6孔培养板：用多聚赖氨酸包被 4. 不含Ca2+ 和Mg2+的1×PBS（pH=7.2），添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素，pH7.4 5. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪，眼科镊 6. 离心管（15ml、50ml） 实验方法： 1. 将分离的两片肺叶组织用含双抗的1×PBS

动物气管和支气管假复层纤毛柱状上皮细胞的培养

冲洗，以除去血液和粘液。 2. 将气管或支气管的一端结扎，另一端插套管并固定。用注射器经套管注入1%中性蛋白酶，至气管充盈为止。将气管浸泡于PBS中，在37℃条件下消化20min。 3. 用注射器抽取培养液，将注射器插入套管，反复冲洗，以分离气管上皮细胞。然后，将气管或支气管游离端的结扎线剪断，回收管腔内的细胞悬液。 4. 用200目不锈钢网筛过滤，将滤液离心（1000r/min，10min）。弃上清液后，再用培养液洗涤离心1次。 5. 用培养液悬浮沉淀细胞，调整细胞

细胞短串联重复序列鉴定的重要性

短串联重复序列（short tandem repeat，STR），又称为微卫星DNA ，重复单位为2-6bp，重复次数10~60多次，在DNA复制过程中的滑动、复制、修复过程中滑动链与互补链的碱基错配，从而导致一个或几个重复单位的缺失或插入，形成STR的多态性，主要应用于遗传连锁图谱分析、家系鉴定、身份认证等领域，同时也是鉴定细胞株被错误识别和交叉污染的主要工具。细胞株被错误识别及交叉污染的现象还是比较普遍的，虽然科研工作者使用各种各样的传统方法来鉴定细胞，但细胞交叉污染的问题却有增无减