植物DNA提取试剂盒 Plant DNA Kit

产品简介
Plant DNA Kit适用于从植物样本中快速、高效地提取 DNA。提取过程采用超顺磁性微球，无需离心操作；使用预制的缓冲液，可直接进行提取，且可根据加入的样本量来调整反应体系。本产品既可以手动进行少量样品的提取，也适合于用自动化工作站进行高通量操作。提取的产物可用于酶切、PCR 扩增、检测等后续实验。

储存条件及有效期
2~35℃下有效期为 12 个月（可在常温下短时间储存或运输，收货后蛋白酶 K 和 RNase A 保存于2~8℃，长期保存建议-20℃。）

使用方法
首次使用前
在 Buffer W2 中加入指定量的无水乙醇，混匀后需保存于 2~8℃，或保存于室温。
若裂解液有沉淀可将其置于 55℃孵育 5-10 分钟使沉淀完全溶解混匀。

1、自备试剂及耗材
无水乙醇
EP 管（1.5mL 离心管，3 个/样品）
单通道移液器：20μL、200μL、1000μL
涡旋震荡器、恒温金属浴（或水浴锅）
磁性分离器

2、操作步骤
1）植物样本研磨（以 100mg 样本量为例）
取足量新鲜植物样本或冻存样本，加入液氮充分研磨。
2）裂解
向 1.5mL 离心管中加入 50-100mg 研磨的植物样本，依次加入 600μL Buffer LB、15μL RNase A溶液、15μL Proteinase K，调整合适的转速漩涡振荡 1min，充分混合后室温静置 15min。13000rpm 离心
5min，转移 300μL 上清至新的 1.5mL 离心管中。

3）结合
向上述离心管中依次加入 600μL Buffer BB、15μL Beads，震荡混匀 30s，室温结合 5min，期间颠倒混匀两次，然后将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，用移液器移去上清液并取下离心管。
注：此步骤磁性分离时间应不少于 2min。
4）洗涤 I
向 1.5mL 离心管中加入 600μL Buffer W1 ，震荡混匀 30s，将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，用移液器移去上清液并取下离心管。再重复此操作 1 次。
5）洗涤 II
将 1.5mL 离心管从磁力架上取下，加入 600μL Buffer W2 ，涡旋震荡 30s，将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，用移液器移去上清液并取下离心管。再重复此操作 1 次。
6）干燥
保持离心管于磁性分离器上，将其置于室温中风干至磁珠表面无明显光泽（10min），取下离心管。
注：干燥过程中若发现反应管中有液体残留时，可用小量程移液器吸弃液体。
7）洗脱
加入 50~100μL 65℃预热的 Buffer EB，震荡混匀 30s，于 65℃加热 5min 后，将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，转移上清液至新的 1.5mL 离心管中，此即为纯化得到的植物 DNA，可保存于-20℃。

注意事项
1. 操作之前，请务必认真阅读本产品手册。
2. 提取效果与样本质量有关，应避免对样本进行反复冻融。
3. 应避免对磁珠进行冷冻、离心等操作。
4. 磁珠取用前应充分重悬均匀。
5. 磁珠干燥前，应用移液器吸尽洗涤液。
6. 应避免磁珠过度干燥，否则会严重降低核酸洗脱效率。
7. 建议使用质量较好的离心管和移液枪吸头，避免因粘附磁珠而造成损失。
8. 若试剂出现沉淀，可在 50℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。