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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
5 x 1.0 mL
描述
Thermo Scientific 蛋白酶K提供5 x 1 mL的分装形式,是一种能够打开脂肪族、芳香族或疏水氨基酸羧基端肽键的内分解酶。蛋白酶K属于丝氨酸蛋白酶家族。本品最小可水解四肽。产品特点
• 即用型溶液
• 兼容广泛的反应条件
应用
• 从鼠尾中分离基因组DNA
• 从培养细胞中分离基因组DNA
• 在从组织或细胞系分离DNA和RNA的过程中清除DNase和RNase
• 确定酶的位置
• 改善PCR产物的克隆效率
注意事项
• 蛋白酶K的推荐工作浓度为0.05至1mg/mL。0.2至1%的SDS或1至4M的尿素能够提升酶活
• Ca2+能够保护蛋白酶K抵抗自分解作用,增加热稳定性并能够调节蛋白酶K底物结合位点的功能
• 在很宽的pH值范围内保持稳定:pH4.0至12.5,最佳活性范围为pH 7.5至8.0
• • 在50至55°C具有最优的活性
• • 在65°C以上温度迅速发生变性
规格
| Form: | Liquid |
|---|---|
| Product Size: | 5 x 1.0 mL |
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文献和实验. Lysis buffer (store on the benchtop without proteinase K). 60 g/ml proteinase K 10mM Tris-Cl, pH 8.2 50mM KCl 2.5mM MgCl2 0.45% Tween-20 0.05% gelatin Master mix . Prepare a master mix containing the following
products. Nearly all routine methods are suitable for template DNA purification. Although even trace amounts of agents used in DNA purification procedures (phenol, EDTA, Proteinase K, etc.) strongly inhibit Taq DNA Polymerase, ethanol precipitation of DNA
3.Microfuge 25 seconds at 16000xg to pellet nuclei. 4.Remove and discard supernatant and repeat steps 2-4 two more times, or until no hemoglobin remains. 5.Resuspend nuclear pellet in 100 µl PBND with 60 µg/ml proteinase K and incubate at 55 ℃
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