密理博 超滤管4ml超滤管，10KD

干货：外泌体研究实操中的常见问题解答

体染色步骤中去除游离染料的第 4、5 步必不可少，以避免游离染料对后期实验的干扰。这一步相当于重新提取外泌体，所有外泌体提取纯化方式都适用。 c、去除游离染料的方法推荐选择 3~10KD 的超滤管，利用其置换溶剂功能去除游离染料。具体步骤和实验参数请咨询超滤管厂商。 d、染料标记外泌体与细胞共孵育的培养条件尽可能使用无血清培养基，以提高细胞对染料标记外泌体的摄取效率，共孵育参考时长为 2 小时。 e、本染料也可用于细胞膜染色，参考剂量染料浓度为 2X10–6 M，细胞浓度为 1X107 cells

Millipore(密理博)Milli-Q超纯水机维护指导

更换过滤柱 1) 将机器调节为STANDBY”状态，卸下终端过滤器，打开取水开关，将系统卸压，待确认机器无水流出后，关闭取水开关。 2) 向左轻扳机器正面蓝色门的锁片（上下各一片），打开蓝门，将“QUANTUM”柱取出，再将机器右侧白色“QGARD”柱上端盖子打开，取下金属锁片，即可取出“QGARD”柱。 3) 将新的“QGARD”柱装到机器上，注意机器上的金属杆要对准柱子上的孔，向左推紧后，将金属锁片锁在金属杆的卡槽内，扣上顶端盖子；再将新的“QUANTUM”柱

如何获得高质量的细胞上清液外泌体？

的复杂了，更不利于后期的研究了。 第三步初步浓缩（也可省略此步）：是不是在提取干细胞上清外泌体过程中会有看不到沉淀的时候？这时心中就没了谱，下游的检测项目做的更是提心吊胆。因此，在这里给出了通过超滤方法进行浓缩处理的建议。超滤的原理就是利用一定的尺寸大小的滤膜拦住大颗粒物而放过小颗粒物的原理，在离心管中最终呈现上液和下液，我们在根据实验目的各取所需。针对细胞上清液的特点，建议可以使用 10 KD ~ 100 KD 之间的超滤管来进行样品浓缩，外泌体通常是在超滤离心管的上室中，浓缩倍数控制到 5 倍