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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
现货
- 保质期:
两年
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 保存条件:
常温
- 规格:
5米/卷
优点
1. 韧性膜材料,不易破损
2. 杂质含量极少
3. 孔径标准均一
4. 对溶质的吸附性小
5. 可选分子量范围广
6. 多种扁平宽度可选
技术参数
1.PH 稳定范围 : 5-9
2. 污染物水平: 硫化物<0.3%; 重金属<50ppm
3. 化学兼容性: 与很多盐兼容,比如 CaCl2, (NH4)2SO4;还可与分子生物学及酶学中常用的水溶剂、有机溶剂 兼容,比如异丙醇、乙醇和丙同。
4. 温度抵抗性:可煮沸,可高压灭菌。
5. 蛋白吸附: 每克透析袋吸附蛋白量小于 1ng。
基本原理
生物样品的透析只需使用专用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子等物质不断扩散透析到袋外,直到袋内、外两边的浓度达到平衡。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析袋的选择
目前市场上提供透析袋的品牌主要来自联合碳化Viskase的普通干型透析袋和美国光谱医学公司Spectrum的(再生)纤维素透析袋。前者为10%甘油涂层,透析袋中含有微量的硫化物、重金属和一些具紫外吸收的杂质,对蛋白质和其他生物活性物质有害,使用前需经过特定处理去除这些物质后才能使用;后者为生物技术膜,生产过程中无重金属及硫化物污染,无需预处理,属于即用型的透析袋。
除了从便捷性和经济性上来考虑(是否需要处理,以及成本高低),在透析袋的选择上必须要考虑以下几个重要参数:
一、选择合适的截留分子量(Molecular weight cutoff,MWCO)
概念:对有孔材料孔径大小的一种描述。在能自由通过某种有孔材料的分子中最大分子的分子量即为该材料的截留分子量。大于截留分子量的分子,被材料截留;小于截留分子量的分子,则可自由通过。截留分子量是凝胶过滤介质、半透膜、超滤膜等材料的重要技术参数。
截留分子量的选择是以预留在膜内的大分子的分子量和将要被除去的小分子污染物的分子量为基础的。为达到合理有效的分离,需分离的两种物质分子量的比率至少为25。
选择截留分子量的经验法则:选择截留分子量值约为要保留的大分子分子量的一半,以获得至少90%的保留率。
二、正确选择扁平宽度
透析袋扁平宽度的选择取决于样品体积和透析容量。较小的透析管透析更快;较大的透析管因扩散距离较长透析较慢。为易于使用,建议使用总长(包括闭合夹和顶部空间)为大约10-15cm的透析袋。
三、透析袋的化学相容性
化学相容性主要用作使用指导,不作为化学相容的保证。温度,浓度,长时间曝光等因素的改变可能影响产品的使用。建议自设条件进行测试。
普通干型透析袋的储存方法
10-29℃保存,每次使用后将余下的膜放回袋子并密封好,以防干裂。
一、普通干型透析袋使用前处理方法
1、把透析袋剪成适当长度(10-20cm左右)的小段。
2、在大体积(500ml)2%(w/v)碳酸氢钠和1mM EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10min。
3、取出用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4、在大体积(500ml)的1mM EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10min。
5、冷却后存放于4℃保存,必须确保透析袋始终浸没于溶液中。从此时起取用透析袋必须戴手套。
6、使用前,须将透析袋用蒸馏水里外加以去清洗,冲洗三次即可。
【注意】:实验要求不高的话,可以用简易处理方法:在沸水中煮10min,再用蒸馏水洗净,即可使用。
普通干型透析袋的使用后保存方法
使用后的透析袋洗净后浸泡于蒸馏水或者30%乙醇中,确保透析袋始终浸没在溶液内,4℃保存。若长时间不用,可加少量NaN3,以防长菌。此时起取用透析袋必须戴手套。洗净晾干的透析袋弯折时易裂口,用时必须仔细检查,不漏时方可重复使用。
二、透析袋的使用
透析程序是一个普遍的基础透析过程。在开始透析之前应考虑到许多变数。透析样品溶剂、膜的化学相容性、膜的截留分子量,透析溶剂、透析体积、温度等变量都会影响透析速率,因此,一些应用中下述透析过程可能需要适当的变化。
1、把适量的透析液(缓冲液)加入透析装置。透析液的体积应为样品体积量的100倍。(例如:在一升透析液中透析10毫升的样品)
2、裁剪适当长度的透析管。预留一段额外长度(约占总样品体积量的20%)作为头部空间。
3、把透析管插入打开的透析夹,在约超出透析夹3-5毫米的位置再夹住。不要折叠透析袋。
4、由透析管开口端将样品装入。调整一下顶部空间的长度,夹紧透析夹。
5、把透析样品放在合适的透析缓冲液中。
6、透析要根据具体的应用需求。通常情况下,允许过夜透析。在持续透析的过程中,至少要进行3次全部更换透析液。建议在(透析后)2-4小时,6-8小时和10-14小时(第2天早晨)更换透析液。在最后一次透析液的更换后要至少继续进行2小时的透析。
注:对于高浓度污染物,样品可能需要较长的时间透析,透析液需要更频繁的更换。
7、透析温度主要取决于样品。温度限制主要取决于膜的类型。纤维素透析袋可以承受的温度高达37°℃,再生纤维素透析袋可以承受的温度高达60°C。
透析袋的贮存和保质期
在适当的储存条件下,保质期为两年。干燥的透析袋要在室温或4C储存在聚乙烯袋中。一旦变湿,透析袋应浸泡在蒸馏水中,如果长时间不用可以加一些防腐剂,以防长菌。
(注:一旦变潮湿,不要让透析袋干燥。不断干燥会造成孔隙结构不可恢复的倒塌)。
| 货号 | 名称 | 压平宽度 | 容量 | 规格 | 价格 |
| JKD1021 | 干型透析袋MD10(截留分子量10000Da,直径6mm) | 10mm | 0.32ml/cm | 5米/卷 | 680 |
| JKD1013 | 干型透析袋MD10(截留分子量8000-14000Da,直径6mm) | 10mm | 0.32ml/cm | 5米/卷 | 390 |
| JKD1019 | 干型透析袋MD10(截留分子量14000Da,直径6mm) | 10mm | 0.32ml/cm | 5米/卷 | 390 |
| JKD1057 | 干型透析袋MD10(截留分子量15000Da,直径6mm) | 10mm | 0.32ml/cm | 5米/卷 | 480 |
| JKD1022 | 干型透析袋MD10(截留分子量25000Da,直径6mm) | 10mm | 0.32ml/cm | 5米/卷 | 980 |
| JKD1051 | 干型透析袋MD25(截留分子量1000Da,直径16mm) | 25mm | 2.0ml/cm | 5米/卷 | 600 |
| JKD1018 | 干型透析袋MD25(截留分子量2000Da,直径16mm) | 25mm | 2.0ml/cm | 5米/卷 | 600 |
| JKD1055 | 干型透析袋MD25(截留分子量3000Da,直径16mm) | 25mm | 2.0ml/cm | 5米/卷 | 430 |
| JKD1001 | 干型透析袋MD25(截留分子量3500Da,直径16mm) | 25mm | 2.0ml/cm | 5米/卷 | 360 |
| JKD1002 | 干型透析袋MD25(截留分子量7000Da,直径16mm) | 25mm | 2.0ml/cm | 5米/卷 | 360 |
| JKD1052 | 干型透析袋MD25(截留分子量6000-8000Da,直径16mm) | 25mm | 2.0ml/cm | 5米/卷 | 400 |
| JKD1053 | 干型透析袋MD25(截留分子量8000Da,直径16mm) | 25mm | 2.0ml/cm | 5米/卷 | 390 |
| JKD1023 | 干型透析袋MD25(截留分子量10000Da,直径16mm) | 25mm | 2.0ml/cm | 5米/卷 | 680 |
| JKD1014 | 干型透析袋MD25(截留分子量8000-14000Da,直径16mm) | 25mm | 2.0ml/cm | 5米/卷 | 280 |
| JKD1003 | 干型透析袋MD25(截留分子量14000Da,直径16mm) | 25mm | 2.0ml/cm | 5米/卷 | 280 |
| JKD1056 | 干型透析袋MD25(截留分子量15000Da,直径16mm) | 25mm | 2.0ml/cm | 5米/卷 | 400 |
| JKD1054 | 干型透析袋MD25(截留分子量25000Da,直径16mm) | 25mm | 2.0ml/cm | 5米/卷 | 650 |
| JKD1008 | 干型透析袋MD34(截留分子量1000Da,直径22mm) | 34mm | 3.8ml/cm | 5米/卷 | 600 |
| JKD1020 | 干型透析袋MD34(截留分子量2000Da,直径22mm) | 34mm | 3.8ml/cm | 5米/卷 | 630 |
| JKD1048 | 干型透析袋MD34(截留分子量3000Da,直径22mm) | 34mm | 3.8ml/cm | 5米/卷 | 400 |
| JKD1004 | 干型透析袋MD34(截留分子量3500Da,直径22mm) | 34mm | 3.8ml/cm | 5米/卷 | 360 |
| JKD1005 | 干型透析袋MD34(截留分子量7000Da,直径22mm) | 34mm | 3.8ml/cm | 5米/卷 | 360 |
| JKD1046 | 干型透析袋MD34(截留分子量6000-8000Da,直径22mm) | 34mm | 3.8ml/cm | 5米/卷 | 390 |
| JKD1049 | 干型透析袋MD34(截留分子量8000Da,直径22mm) | 34mm | 3.8ml/cm | 5米/卷 | 400 |
| JKD1047 | 干型透析袋MD34(截留分子量10000Da,直径22mm) | 34mm | 3.8ml/cm | 5米/卷 | 680 |
| JKD1015 | 干型透析袋MD34(截留分子量8000-14000Da,直径22mm) | 34mm | 3.8ml/cm | 5米/卷 | 295 |
| JKD1006 | 干型透析袋MD34(截留分子量14000Da,直径22mm) | 34mm | 3.8ml/cm | 5米/卷 | 135 |
| JKD1050 | 干型透析袋MD34(截留分子量15000Da,直径22mm) | 34mm | 3.8ml/cm | 5米/卷 | 400 |
| JKD1007 | 干型透析袋MD34(截留分子量25000Da,直径22mm) | 34mm | 3.8ml/cm | 5米/卷 | 690 |
| JKD1024 | 干型透析袋MD44(截留分子量1000Da,直径28mm) | 44mm | 6.2ml/cm | 5米/卷 | 600 |
| JKD1025 | 干型透析袋MD44(截留分子量2000Da,直径28mm) | 44mm | 6.2ml/cm | 5米/卷 | 600 |
| JKD1044 | 干型透析袋MD44(截留分子量3000Da,直径28mm) | 44mm | 6.2ml/cm | 5米/卷 | 510 |
| JKD1009 | 干型透析袋MD44(截留分子量3500Da,直径28mm) | 44mm | 6.2ml/cm | 5米/卷 | 480 |
| JKD1010 | 干型透析袋MD44(截留分子量7000Da,直径28mm) | 44mm | 6.2ml/cm | 5米/卷 | 360 |
| JKD1041 | 干型透析袋MD44(截留分子量6000-8000Da,直径28mm) | 44mm | 6.2ml/cm | 5米/卷 | 390 |
| JKD1040 | 干型透析袋MD44(截留分子量8000Da,直径28mm) | 44mm | 6.2ml/cm | 5米/卷 | 390 |
| JKD1042 | 干型透析袋MD44(截留分子量10000Da,直径28mm) | 44mm | 6.2ml/cm | 5米/卷 | 750 |
| JKD1016 | 干型透析袋MD44(截留分子量8000-14000Da,直径28mm) | 44mm | 6.2ml/cm | 5米/卷 | 240 |
| JKD1011 | 干型透析袋MD44(截留分子量14000Da,直径28mm) | 44mm | 6.2ml/cm | 5米/卷 | 230 |
| JKD1045 | 干型透析袋MD44(截留分子量15000Da,直径28mm) | 44mm | 6.2ml/cm | 5米/卷 | 400 |
| JKD1043 | 干型透析袋MD44(截留分子量25000Da,直径28mm) | 44mm | 6.2ml/cm | 5米/卷 | 640 |
| JKD1026 | 干型透析袋MD55(截留分子量1000Da,直径35mm) | 55mm | 9.6ml/cm | 5米/卷 | 680 |
| JKD1037 | 干型透析袋MD55(截留分子量3000Da,直径35mm) | 55mm | 9.6ml/cm | 5米/卷 | 670 |
| JKD1027 | 干型透析袋MD55(截留分子量3500Da,直径35mm) | 55mm | 9.6ml/cm | 5米/卷 | 650 |
| JKD1028 | 干型透析袋MD55(截留分子量7000Da,直径35mm) | 55mm | 9.6ml/cm | 5米/卷 | 500 |
| JKD1034 | 干型透析袋MD55(截留分子量6000-8000Da,直径35mm) | 55mm | 9.6ml/cm | 5米/卷 | 520 |
| JKD1038 | 干型透析袋MD55(截留分子量8000Da,直径35mm) | 55mm | 9.6ml/cm | 5米/卷 | 500 |
| JKD1035 | 干型透析袋MD55(截留分子量10000Da,直径35mm) | 55mm | 9.6ml/cm | 5米/卷 | 900 |
| JKD1030 | 干型透析袋MD55(截留分子量8000-14000Da,直径35mm) | 55mm | 9.6ml/cm | 5米/卷 | 380 |
| JKD1029 | 干型透析袋MD55(截留分子量14000Da,直径35mm) | 55mm | 9.6ml/cm | 5米/卷 | 380 |
| JKD1039 | 干型透析袋MD55(截留分子量15000Da,直径35mm) | 55mm | 9.6ml/cm | 5米/卷 | 480 |
| JKD1036 | 干型透析袋MD55(截留分子量25000Da,直径35mm) | 55mm | 9.6ml/cm | 5米/卷 | 690 |
| JKD1031 | 干型透析袋MD77(截留分子量10000Da,直径49mm) | 77mm | 18.9ml/cm | 5米/卷 | 1050 |
| JKD1017 | 干型透析袋MD77(截留分子量8000-14000Da,直径49mm) | 77mm | 18.9ml/cm | 5米/卷 | 400 |
| JKD1012 | 干型透析袋MD77(截留分子量14000Da,直径49mm) | 77mm | 18.9ml/cm | 5米/卷 | 400 |
| JKD1033 | 干型透析袋MD77(截留分子量15000Da,直径49mm) | 77mm | 18.9ml/cm | 5米/卷 | 560 |
| JKD1032 | 干型透析袋MD77(截留分子量25000Da,直径49mm) | 77mm | 18.9ml/cm | 5米/卷 | 690 |
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文献和实验生物样品的透析只需使用专用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子等物质不断扩散透析到袋外,直到袋内、外两边的浓度达到平衡。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
直径mm 压平宽度(半周长)mm 截留分子量Da 22 34 3500 22 34 7000
的方法进行回收,如电泳洗脱法:在紫外灯下切取含核酸区带的凝胶,将其装入透析袋(内含适量新鲜电泳缓冲液),扎紧透析袋后,平放在水平型电泳槽两电极之间的浅层缓冲液中,100V电泳2~3小时,然后正负电极交换,反向电泳2分钟,使透析袋上的DNA释放出来。吸出含DNA的溶液,进行酚抽提、乙醇沉淀等步骤即可完成样品的回收。 其它还有低融点琼脂糖法、醋酸铵溶液浸出法、冷冻挤压法等,但各种方法都仅仅有利于小分子量DNA片段(<1kb)的回收,随着DNA分子量的增大,回收量显著下降。 (三)等电聚焦电泳
电泳技术(electrophoretic techniques)的应用
样品的分离情况,对需要的DNA分子或特殊片段可从电泳后的凝胶中以不同的方法进行回收,如电泳洗脱法:在紫外灯下切取含核酸区带的凝胶,将其装入透析袋(内含适量新鲜电泳缓冲液),扎紧透析袋后,平放在水平型电泳槽两电极之间的浅层缓冲液中,100V电泳2-3小时,然后正负电极交换,反向电泳2分钟,使透析袋上的DNA释放出来。吸出含DNA的溶液,进行酚抽提、乙醇沉淀等步骤即可完成样品的回收。 其它还有低融点琼脂糖法、醋酸铵溶液浸出法、冷冻挤压法等,但各种方法都仅仅有利于小分子量DNA片段(<1kb)的回收
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