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- KA&M-BIO
- 国产
- MZ5373
- 2026年05月29日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 英文名：
pCR4-TOPO-ADGRG7
- 库存：
999
- 供应商：
圻明生物
- 规格：
ug
培养条件:37度
表达宿主:大肠杆菌BL21 DE3
培养条件:37℃，有氧，LB
诱导方式:IPTG或乳糖及其类似物
5＇测序引物:pGEX5: GGGCTGGCAAGCCACGTTTGGTG
3＇测序引物:pGEX3: CCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGG
备注:可用GST亲和柱纯化重组蛋白
质粒宿主：大肠杆菌；哺乳细胞；酵母菌；噬菌体；乳酸菌；枯草杆菌；丝状真菌；等
质粒用途：蛋白表达；基因编辑；诱导染色；定位杂交等
片段类型：ORF；cDNA；shRNA；sgRNA；ncRNA；miRNA；cirRNA等
片段物种：空载体
原核抗性：Amp
质粒库-pCR4-TOPO-ADGRG7到货后请根据标签上文字判断产品属性（质粒/甘油菌）
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
质粒转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。
pECMV-3×FLAG-E2F7(human)(569-879aa)-SV40-Neo 哺乳细胞 蛋白表达 ORF 人 Amp Neo/G418
pEnCMV-USP49(human)-3×Myc-SV40-Neo 哺乳细胞 蛋白表达 ORF 人 Amp Neo/G418
pEnCMV-TNFSF4(mouse)-3×FLAG-SV40-Neo(1同义突变) 哺乳细胞 蛋白表达 ORF 小鼠 Amp Neo/G418
pEnCMV-CTLA4(human)-1-3×FLAG-SV40-Neo 哺乳细胞 蛋白表达 ORF 人 Amp Neo/G418
pEnCMV-SLC26A5(mouse)-3×FLAG-SV40-Neo 哺乳细胞 蛋白表达 ORF 小鼠 Amp Neo/G418
pCDH-CMV-ANXA1(human)-EF1a-Puro 哺乳细胞,慢病毒 蛋白表达 ORF 人 Amp Puro
pBV220-TNF(mouse)-Linker-mCherry 大肠杆菌 蛋白表达 ORF 小鼠 Amp 红色
pCDH-CMV-SIRT5(human)-EF1a-CopGFP-T2A-Puro(1同义突变) 哺乳细胞,慢病毒 蛋白表达 ORF 人 Amp Puro 绿色
pEnCMV-ADAM22(human)-7-3×FLAG 哺乳细胞 蛋白表达 ORF 人 Amp Neo/G418
pEnCMV-USP4(human)-3×Myc-SV40-Neo 哺乳细胞 蛋白表达 ORF 人 Amp Neo/G418
pHAGE-CMV-TFEB(mouse)-3×FLAG-PGK-Puro 哺乳细胞,慢病毒 蛋白表达 ORF 小鼠 Amp Puro
pLentiCRISPR V2-U6-USP53(human)-sgRNA1 哺乳细胞,慢病毒 基因敲除 CRISPR,Cas9,sgRNA 人 Amp Puro
pLKO.1-U6-c-JUN(human)-shRNA2-hPGK-EGFP 哺乳细胞,慢病毒 干扰沉默 shRNA 人 Amp 绿色
pLKO.1-U6-c-JUN(human)-shRNA1-hPGK-EGFP 哺乳细胞,慢病毒 干扰沉默 shRNA 人 Amp 绿色
pLKO.1-U6-IBA57(human)-shRNA1-hPGK-EGFP 哺乳细胞,慢病毒 干扰沉默 shRNA 人 Amp 绿色
pCMV-Mem-mCherry-SV40-Neo 哺乳细胞 亚细胞定位 ORF Kan Neo/G418 红色
pBlueScriptR-PARP12(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Amp
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文献和实验【精华】vol 687 Chapter 3 采用Splinkerette-PCR技术对前病毒基因组插入位点进行分离
Methods in Molecular Biology vol.687 Park D.J. (ed.) PCR Protocols Chapter 3 PART II ：Cloning and Sequencing Isolation of Genomic Insertion Sites of Proviruses Using Splinkerette-PCR-Based Procedures Bin Yin Abstract
Invitrogen一家独大。前两年Strategene公司也推出了5分钟的StrataClone技术，与之抗衡。StrataClone的原理与TOPO克隆类似，但也不完全相同，估计是专利的问题。它也是利用了牛痘病毒的拓扑异构酶I的连接功能。不过载体分成了两段，每一段的一端连着拓扑异构酶I和U尾巴，另一端则包含loxP识别序列。PCR产物通过A-U互补而形成一条线性分子(载体臂-PCR产物-载体臂)。这时转化进表达Cre重组酶的感受态细胞。在Cre重组酶的作用下，loxP位点发生重组，产生可复制的环状分子
Real-Time PCR Quantification Using Cloned Standards and Multiple Housekeeping Genes
Quantitative real time PCR (QRT-PCR) has become one of the most widely used methods of assessing gene expression owing to its sensitivity and reduced run time compared with traditional methods such as RNase protection assays, tissue (Northern
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