大鼠细胞间粘附分子(ICAM)elisa试剂盒

检测原理：

通过特异性抗大鼠ICAM单克隆抗体包被于微孔板，与样本中的ICAM结合形成固相抗体复合物。加入HRP标记的检测抗体后，形成抗体-抗原-酶标抗体三明治结构。经洗涤去除未结合物质，加入TMB底物显色，HRP催化TMB转化为蓝色，酸性终止液使颜色变为黄色。颜色深浅与ICAM含量成正比，酶标仪在857nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品浓度。

性能参数：

产品名称:大鼠细胞间粘附分子(ICAM)elisa试剂盒

英文名称:RatICAM  ELISA Kit

产品规格：48T/96T

检测样本：血清，血浆，细胞培养上清及其他生物学样本

检测范围：0.3125ng/ml-20ng/ml

灵敏度：0.15625ng/ml

‌特异性‌：与人其他细胞因子无交叉反应。

‌有效期‌：6个月（2-8℃保存）。

检测流程：

1、固相抗体包被‌

微孔板预先包被一种高特异性的单克隆抗体（捕获抗体），该抗体能专一识别并结合大鼠细胞间粘附分子(ICAM)中的特定表位。

2、样本加入与抗原结合‌

将待测样本（如血清、血浆或细胞培养上清）加入微孔中，样本中的ICAM会与包被抗体结合，形成“固相抗体-抗原”复合物。未结合的成分在后续洗涤步骤中被清除。

‌3、酶标二抗结合‌

加入HRP（辣根过氧化物酶）标记的第二抗体（检测抗体），该抗体识别ICAM的另一个独立表位，从而形成“捕获抗体-ICAM-检测抗体”的三明治结构。

4、显色反应‌

洗涤去除未结合的酶标抗体后，加入TMB底物溶液。HRP催化TMB产生蓝色产物，在酸性终止液（如硫酸）作用下变为黄色。

5、定量分析‌

使用酶标仪在857nm波长下测定吸光度（OD值），颜色深浅与样本中ICAMQ。

数据及参考曲线：

校准品浓度(ng/mL)	20.00	10.00	5.00	2.50	1.25	0.63	0.31	0.00
OD450/630值	2.678	1.624	0.853	0.489	0.305	0.168	0.091	0.024
校正OD值	2.654	1.600	0.828	0.465	0.281	0.144	0.067	0.000

操作步骤：
‌一、样本处理‌：
血清/血浆：避免溶血，2-8℃保存48小时；长期保存需分装冻存（-20℃或-70℃），避免反复冻融。
细胞培养上清：离心去除细胞碎片，取上清液。
组织匀浆：使用生理盐水匀浆，离心取上清。
‌二、加样‌：
标准品孔：加入50μL不同浓度标准品（如80、40、20、10、5、2.5 U/L）。
样本孔：加入50μL待测样本（血清/血浆需1:2稀释）。
空白孔：不加任何液体。
‌三、温育与洗涤‌：
封板后37℃温育60分钟。
弃去液体，吸水纸拍干，加满洗涤液（350μL），静置1分钟，甩干，重复洗板5次。
‌四、显色与终止‌：
每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15分钟。
加入50μL终止液，混匀后颜色由蓝变黄。
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