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2年
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上海信帆生物
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大量
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10g
缓冲液的配制和应用
为了配制一定pH的缓冲溶液,首先选定一个弱酸,它的pKaφ尽可能接近所需配制的缓冲溶液的pH值,然后计算酸与碱的浓度比,根据此浓度比便可配制所需缓冲溶液。
以上主要以弱酸及其盐组成的缓冲溶液为例说明它的作用原理、pH计算和配制方法。对于弱碱及其盐组成的缓冲溶液可采用相同的方法。
缓冲溶液在物质分离和成分分析等方面应用广泛,如鉴定Mg2+ 离子时,可用下面的反应:
白色磷酸铵镁沉淀溶于酸,故反应需在碱性溶液中进行,但碱性太强,可能生成白色Mg(OH)2沉淀,所以反应的pH值需控制在一定范围内,因此利用NH3·H2O和NH4Cl组成的缓冲溶液,保持溶液的pH值条件下,进行上述反应。
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文献和实验【原创】Tricine SDS-PAGE凝胶配方(16.5%)
战友是用不上了,但后来的战友也许能用上,我也欣慰啦^_^一、Tricine SDS-PAGE药品配方如下1.正极电泳缓冲液(1x):12.19gTris 先溶于400ml双蒸水1mol/L的HCL调至PH8.9,再定容至500ml。2.负极电泳缓冲液(1x):6.055g Tris ,8.958g Tricine(三羟甲基甘氨酸),5.0g SDS ,将这三种药品溶于400ml双蒸水中,1mol/L的HCL滴定到PH8.45(这步大家注意了,我实际试验操作发现没调PH值前,PH值实际为8.35
[建议]发现一个重大问题:两个版本的tricine-sds-page存在很大的差异(差错)??
液为8.25,阳极为8.9。另外电泳的电压不可过高。40~60V即可。 21.正极电泳缓冲液(1x): 12.19gTris 先溶于400ml双蒸水1mol/L的HCL调至PH8.9,再定容至500ml。 2.负极电泳缓冲液(1x): 6.055g Tris ,8.958g Tricine(三羟甲基甘氨酸),5.0g SDS ,将这三种药品溶于400ml双蒸水中,1mol/L的HCL滴定到PH8.45(这步大家注意了,我实际试验操作发现没调PH值前,PH值实际为8.35,因此用的是NaOH
凝胶电泳具有电泳和分子筛的双重作用其分辨力较高。 三、器材 1、电泳议(600V)及盘状电泳槽 2、电泳玻璃管(用碱性较低的玻璃管),内径5~7mm,长80~100mm 3、玻璃架(制胶时用来垂直插放玻璃管) 4、微量注射器或微量吸管 5、带长针头的注射器 6、日光灯 7、带有玻璃珠或玻璃棒的一小段乳胶管四、试剂和材料 1、细菌培养物 2、贮液和工作溶液按下表配制贮液及工作溶液的配制 ①贮液
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