Strep-Tactin Superflow (2 ml)

纯化 Strep-Tag 融合蛋白

下，经过快速的洗脱步骤，得到高纯度、高浓度的目标蛋白 (> 95%) 。   Strep-Tactin® 与 Strep-Tactin®XT 纯化流程的差异主要在于：   将靶蛋白从 Strep-Tactin®XT 洗脱时，需使用含有 50 mM Biotin (生物素) 的 Buffer BXT (由于亲和力大幅提升，Desthiobiotin 不能有效的洗脱靶蛋白。) 再生 Strep-Tactin®XT Superflow® 填料时，需使用 10 mM NaOH (因使用生物素进行洗脱

对比 Strep-tag 与 His-tag 系统异同点？

得到所需的蛋白质，为目前所常用的技术方法。 His-tag系统有很高的蛋白产量(5–40 mg/ml resin)，但理想情况下的纯度约为80%左右。但如需在随后的分析中测量蛋白质的功能，就需要再进行更多的cleaning steps。 Strep-tag®系统一步纯化满足的纯度可达到95%，无需进行更多的纯化步骤即可直接进行蛋白的分析。产量数据为16 mg/ml。 深度对比Strep-tag®与His-tag系统 His-tag是以6个组氨酸残基组合的融合标签，其基于蛋白质表面的组氨酸残基侧链

样品体积增加后，对蛋白质的纯化效率有怎样的影响？

Expi Supernatant 进行培养。 纯化过程中，选择柱体积为 0.2 ml 的三种纯化柱：Ni Sepharose 6 FastFlow, Ni Sepharose Excel, 和 Strep-Tactin®XT 4Flow®。 分别用其纯化 60CV (column volume, 柱体积) 和 120CV 的样品，并保持上样样品中的蛋白质含量在纯化柱最大结合载量 80%-95 %。 二、实验结果 01 对比蛋白质回收效率 对于不同的填料，可以从洗脱组分中回