天然细胞裂解缓冲液（GentleLys溶解）

Cube Biotech GentleLys 缓冲液是一款100%不含去污剂、不使细胞变性的溶液，可用于裂解培养细胞（包括铺板细胞和悬浮培养沉淀细胞），并在裂解过程中溶解所有细胞膜。GentleLys 能够从细胞的各个区室中提取可溶性蛋白并稳定膜蛋白。它适用于多种应用，包括免疫分析、蛋白质分析、质谱分析和蛋白质纯化。

该缓冲液有两种型号：GentleLys – Dissolve 可在15分钟内裂解细胞；GentleLys – Stabilize 可裂解所有细胞，并使细胞的整个蛋白质组（可溶性蛋白和膜蛋白）可用于您的分析方法。它能够溶解所有细胞膜，并将表达的膜蛋白稳定在其天然构象中。这得益于其中添加的合成纳米盘共聚物。

注意： GentleLys缓冲液仅适用于真核细胞。细菌细胞不能用GentleLys缓冲液裂解。另一种需要注意的细胞类型是植物细胞。由于细胞壁的存在，无法用GentleLys处理完整的植物细胞。但是，处理原生质体（去除细胞壁后）是可行的！

图 1：两种 GentleLys 产品的概览。它们几乎可以用于相同的应用。唯一的区别在于 GentleLys Dissolve 不能稳定膜蛋白，而 GentleLys Stabilize 可以。

图 2：分别使用 RIPA 缓冲液、GentleLys – Dissolve / GentleLys – Stabilize 或对照缓冲液处理 1 分钟/10 分钟后可计数细胞总数。细胞计数越低表示细胞完全裂解。可计数细胞越少，说明细胞裂解越彻底（未检测到细胞器）。请注意，图中未显示 GentleLys – Stabilize 处理 1 分钟后的结果。这是因为我们建议至少处理 15 分钟。

图 3： HEK293 细胞上清液经 RIPA 缓冲液、GentleLys 溶解剂或对照缓冲液处理 1 分钟/10 分钟/30 分钟后进行 SDS-PAGE 分析。孵育后，离心分离完整细胞和细胞碎片，取等体积上清液进行 SDS-PAGE 电泳，并用考马斯亮蓝染色检测。B图为A图所示数据的定量分析。已测量各条带的强度。与 GentleLys 相比，SDS-PAGE 条带分析显示蛋白质含量增加了约 20%。RIPA 处理组的蛋白质含量设定为 100%。

图 4A：用 RIPA 缓冲液、GentleLys 溶解液或对照缓冲液处理 T.ni. 细胞 5 分钟/10 分钟后，对细胞上清液进行 SDS-PAGE 分析。孵育后，离心分离完整细胞和细胞碎片，取等体积的上清液进行 SDS-PAGE 电泳，并用考马斯亮蓝染色检测。B ：对 A 图中累积数据进行定量分析。测量了各条带的强度。使用 GentleLys 溶解液后，通过 SDS-PAGE 条带分析可检测到约 50% 的蛋白质含量增加。RIPA 溶解液的蛋白质含量设定为 100%。