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- DM-QT46308
- 上海
- 2026年03月24日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海笃玛生物科技有限公司
- 库存：
999
- 灵敏度：
咨询
- 样本：
体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等
- 标记物：
电询
- 适应物种：
其它
- 应用：
科研实验
- 检测方法：
双抗夹心法
- 检测范围：
电询
- 规格：
96T/48T
| 规格： | 96T | 产品价格： | ￥1860.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 48T | 产品价格： | ￥1380.0 |
贝类（Shellfish）酪蛋白激酶2（CK2）ELISA检测试剂盒
该试剂盒仅用于科研实验
产品货号：DM-QT46308
产品规格：48/96T
一、ELISA 检测原理
ELISA（酶联免疫吸附测定）核心是抗原 - 抗体特异性结合 + 酶促显色反应，通过颜色深浅反映待测物浓度。常用类型及原理：
1. 双抗体夹心法（测大分子抗原 / 蛋白）
固相包被捕获抗体 → 加入样本（待测抗原）→ 结合酶标检测抗体 → 加底物显色 → 吸光度与抗原浓度正相关。
2. 间接法（测抗体）固相包被抗原 → 样本中待测抗体结合 → 加酶标二抗 → 底物显色 → 吸光度与抗体浓度正相关。
3. 竞争法（测小分子抗原 / 半抗原）待测抗原与酶标抗原竞争结合有限抗体 → 待测物越多，显色越浅 → 吸光度与浓度负相关。
二、试剂盒的组成
三、ELISA实验所需材料
（一）试剂盒本身（核心）
1. 预包被酶标板（96 孔）
2. 标准品（梯度浓度）
3. 酶结合物（酶标抗体 / 酶标抗原）
4. 样本稀释液
5. 洗涤液（浓缩液，使用前稀释）
6. 显色底物液（A、B 液或单液）
7. 终止液
8. 封板膜 / 封板胶
（二）样本相关
1. 待测样本（血清、血浆、细胞上清、组织匀浆等）
2. 样本处理试剂（视样本类型）：
抗凝剂（EDTA、肝素、柠檬酸钠等）
蛋白酶抑制剂（如组织样本）
裂解液、匀浆缓冲液等
（三）仪器设备
1. 酶标仪（450 nm 为主，部分需双波长）
2. 洗板机（推荐）或洗板瓶 / 排枪
3. 移液器（0.5–10 μL、10–100 μL、100–1000 μL）
4. 移液器吸头（带滤芯更佳）
5. 涡旋振荡器
6. 离心机（样本处理用）
7. 恒温培养箱 / 水浴（37℃ 孵育用）
8. 冰箱（2–8℃、-20℃）
（四）耗材与辅助用品
1. EP 管、冻存管
2. 一次性手套、口罩
3. 吸水纸 / 滤纸
4. 计时器
5. 去离子水 / 蒸馏水（用于洗涤液稀释）
6. 废液缸、吸水纸
（五）可选 / 特殊实验材料
1. 封板膜 / 封板胶
2. 振荡器（微孔板摇床）
3. 多道移液器（8/12 道）
4. 加样槽
5. 微孔板封口膜、铝箔（避光）
四、试剂准备的注意事项
1.所有试剂按说明书指定温度保存（2–8℃ 或 -20℃）
2.避免阳光直射，酶结合物、底物需避光
3.不同批号试剂不可混用
4.加样前检查试剂是否浑浊、沉淀、变色，异常则弃用
5.所有试剂开盖后尽快使用，剩余按要求保存
五、结果计算（通用流程）
1. 数据处理
（1）扣除空白孔 / 本底孔吸光度（OD），得到校正 OD 值。
（2）以标准品浓度为 X，校正 OD 为 Y，做标准曲线（常用四参数拟合 4PL）。 2.浓度计算
（1）样本 OD 代入标准曲线，得到理论浓度 C₀。
（2）若样本经稀释，最终浓度：C=C0×稀释倍数
2. 有效性判定（常见）
（1）空白 OD 通常 ≤ 0.1；
（2）标准曲线 R² ≥ 0.98；
（3）质控（QC）在可接受范围；
（4）样本 OD 超出曲线上限 / 下限时需重新稀释 / 浓缩复测。
六、示例（双抗体夹心法）
标准品浓度：0、10、20、50、100、200 pg/mL
测得 OD：0.05、0.12、0.25、0.58、1.10、1.95
校正后 OD：0、0.07、0.20、0.53、1.05、1.90
拟合曲线后，某样本校正 OD=0.35 → 曲线读出 C₀≈30 pg/mL若样本稀释 5 倍，则最终浓度 = 30 × 5 = 150 pg/mL。
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文献和实验质芯片检测。此外，肽芯片或基于质谱的方法[ 20，21] 也可以用于这方面。 我们在此介绍基于蛋白质芯片技术的蛋白磷酸化筛选方法和高通量确定蛋白激酶底物的方法。我们已成功地用这种筛选工具鉴定大麦酪蛋白激酶 2α ( CK 2α) 和不同的拟南芥丝裂原活化蛋白（MAP) 激酶 [23] 的新靶标。我们这个方法使用本书第 28 章详细描述的植物蛋白质芯片（见第 28 章）。在放射性【 γ33 磷】三磷酸腺苷存在的条件下，用可溶和具有活性的激酶孵育芯片。通过磷屏成像仪或 X 射线胶片检测到的放射性信号，对可能
3K/AKT指标实际上需要测两种：一个是PI3K/AKT的蛋白表达量， 一个是PI3K/AKT的蛋白激酶活性（磷酸化与被磷酸化）。 此外，我看你是打算药物刺激作用后提取PI3K/AKT蛋白做检测，而不是直接Elisa检测PI3K/AKT， 这涉及到你提取蛋白时PI3K/AKT活性是否会丧失问题。而蛋白表达量检测，只要有蛋白抑制剂存在就没有太大降解问题，但需要做Western Blot；本身Western Blot测蛋白含量也很复杂（如：提取蛋白，蛋白上样前定量，跑电泳， 转膜，加一抗二抗，显影
可选择，并有对应蛋白标准品及相关产品，如ABC试剂盒，各种标记二抗，Western试剂盒，蛋白质分子量Marker，核抽提物等提供，为免疫学研究工作提供了极大的方便。Abcam:著名的抗体生产厂家，提供近4000种一级抗体，500种二级抗体，400余种蛋白质及多肽，以及各类ELISA检测试剂盒。四、荧光探针及交联技术Molecular Probes：美国一家在荧光技术领域独树一帜的生物技术公司，一直致力于开发用于生物医学研究的荧光标记试剂。它们拥有2500多种独家产品，包括离子指示剂，高灵敏度的核酸及蛋白
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