- ￥200 - 1200
- 经科
- JK5441
- 国产
- 2026年03月23日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
现货
- 英文名：
Fast 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海经科化学科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
10T/100T
| 规格： | 10T | 产品价格： | ￥200.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 100T | 产品价格： | ￥1200.0 |
产品简介
本产品是品牌首推的高性能cDNA合成试剂，具有更快的反转录速度，更高的反转录产量，以及极强的残留物耐抑制性，适用于动物、植物以及微生物RNA的反转录反应。同时，试剂中所含的gDNA Digester Mix可消化达1000 ng的DNA，可有效避免RNA模板中的残留DNA污染，保证后续结果更加可靠。
本产品反转录产物，可用于下游qPCR应用。推荐搭配：通用多重qPCR探针法预混液、通用qPCR染料法预混液或可示踪qPCR染料法预混液进行高性能的基因表达分析。
产品储存
-25℃~ -15℃保存，有效期1年。
操作注意
1. 加样和配液步骤都尽量在冰上操作。
2. 每个组分在使用前都应上下颠倒混匀，低速离心。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
4. 本产品仅作科研用途！
操作说明
一、含gDNA去除反转录步骤
1. DNA消化
在RNase-free离心管中配制如下混合液，用移液器轻轻吹打混匀。37℃孵育2 min。
|
组分 |
使用量 |
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gDNA Digester Mix |
2 μL |
|
Total RNA or mRNA |
Total RNA：10 pg-2 μg mRNA：10 pg-500 ng |
|
RNase-free H2O |
Up to 14 μL |
【注】：建议Total RNA的投入量不超过2 μg。如果目的基因表达丰度低，可增加投入量至最多5 μg。
2. 反转录体系配置（以20μL为例）
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组分 |
使用量 |
|
上一步反应液 |
14 μL |
|
cDNA Fast Synthesis SuperMix |
6 μL |
3. 反转录程序设置
|
温度 |
时间 |
|
50℃ |
5 min |
|
85℃ |
5 sec |
【注】：逆转录产物可直接进行下游qPCR检测。若短时间内不进行下游实验，可放置于4℃保存。若长期保存，建议分装后，于-20°C保存，避免反复冻融。
二、不含gDNA去除反转录步骤
1. 反转录体系配置（以20μL为例）
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组分 |
使用量 |
|
cDNA Fast Synthesis SuperMix |
6 μL |
|
Total RNA or mRNA |
Total RNA：10 pg-2 μg mRNA：10 pg-500 ng |
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RNase-free H2O |
Up to 20 μL |
2. 反转录程序设置
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温度 |
时间 |
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50℃ |
5 min |
|
85℃ |
5 sec |
【注】：逆转录产物可直接进行下游qPCR检测。若短时间内不进行下游实验，可放置于4℃保存。若长期保存，建议分装后，于-20°C保存，避免反复冻融。
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文献和实验试剂中所含的gDNA Digester Mix可消化达1000 ng的DNA，可有效避免RNA模板中的残留DNA污染，保证后续结果更加可靠。
可以获得真核生物 mRNA 全长；当 RNA 没有 polyA 尾（原核 mRNA 或 rRNA）或断裂时，就需要考虑使用随机引物进行 RNA 的反转录，随机引物可以很均一的逆转出 RNA 上的信息，但逆转出的 cDNAs 长度都较短。此时，对于扩增真核生物的 total RNA 来说，这时随机引物和 Oligo-dT 引物的混合物能给出一个令人满意的结果。 诺唯赞的 HiScript® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)（R312）或可助
性，因而即使是最具挑战性的模板也可以进行有效的RT-PCR.。 通过SuperMix形式快速合成cDNA SuperScript™ III First—Strand Synthesis SuperMix将所有进行强大的、灵敏的第一链cDNA合成所必须的组分组合成快速、易于使用的 SuperMix形式。SuperMix形式包含 2x RT缓冲反应混合物、dNTPs、MgCl2、 以及由SuperScript™ III RT和RNaseOUT™.组成的酶混合物。也提供优化的退火缓冲
(Sigma #M0133) Notes This procedure produces 1st strand cDNA with an anchored oligo dT primer and AA-UTP. It then couples couples amino reactive Cy-dyes to the AA-UTP. For spotted arrays control RNA should also be labeled using the opposing dye
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