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多克隆
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p-ERK 1/2-AlexaFluor 488(clone E10)
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文献和实验to 1 hour Wash twice with 10% FBS/DMEM:F12 Resuspend in 100μl of 10% FBS/DMEM:F12 containing secondary antibody (AlexaFluor 488 conjugate) at 1:100 Incubate for 30min Wash twice with 10% FBS/DMEM:F12 Resuspend in appropriate
(0.05% Tween-20),室温震荡封闭 1h。 7. 一抗孵育:加入稀释后的一抗 (见表 1),4℃ 过夜孵育。 8. 洗涤:一抗孵育结束后,含有 0.05% Tween-20 的 PBS 洗涤 3 次, 每次 100g 离心 5min。 9. 二抗孵育:加入二抗 (AlexaFluor 555 驴抗兔 1:200、AlexaFluor 488 驴抗小鼠1:200) 及 DAPI (1:1000),室温避光震荡孵育 2h。 10. 洗涤与封片:含有 0.05% Tween-20 的 PBS 洗涤
15 August 2011. ^ a b Wheeler, B.; Heimberg, A.; Moy, V.; Sperling, E.; Holstein, T.; Heber, S.; Peterson, K. (2009). "The deep evolution of metazoan microRNAs". Evolution & development 11 (1): 50–68. doi:10.1111/j.1525-142X.2008.00302.x. PMID
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