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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20摄氏度
- 保质期:
3个月
- 英文名:
(不稳定)pLV3-CMV-Eif2ak1-3×FLAG-Puro plasmid
- 库存:
20
- 供应商:
LSMBIO
- 规格:
1ug
(不稳定)pLV3-CMV-Eif2ak1-3×FLAG-Puro plasmid
PVT105639
(不稳定)pLV3-CMV-Eif2ak1-3×FLAG-Puro plasmid Information
Plasmid name: pLV3-CMV-Eif2ak1(mouse)-3×FLAG-Puro
Alias: NM_013557.3;HCR; Hri
Gene lenght: 1857
Host: Mammalian cells,lentivirus
Use(s): Protein Expression
Fragment type: ORF
Species: Mouse
Prokaryotic resistance: Amp
Screening marker: Puro
Fluorescent labeling:
Promoter: CMV
Replicon: pUC
Growth Strain(s): Stbl3
Growth Temperature: 30°C
Vector backbone:
Forward primer: CMV-F
Reverse primer:
Copy number: High
Induction:
(不稳定)pLV3-CMV-Eif2ak1-3×FLAG-Puro plasmid Description
(不稳定)pLV3-CMV-Eif2ak1-3×FLAG-Puro plasmid Sequence
//
Caution:
1.This product is FOR RESEARCH USE ONLY!
2.The item is lyophilized form, Please take the powder plasmid by centrifugation at 5000rpm/min for 1min. Add 20μl ddH2O in to the tube of plasmid.Take 2ul plasmid into 100 μ L corresponding competent cell, centrifugal then full coating on plate.
3.Shipping temperature is 2-8℃.
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文献和实验一、试剂准备 1、Cas9 过表达慢病毒载体选择。 货号 名称 CR2001 pLV-Cas9-Puro CR2002 pLV-Cas9-Neo CR2003 pLV-Cas9Nick-Puro CR2004
基因克隆于质粒载体上,进而整合到宿主染色体,是克服质粒不稳定性的一个有效途径。一、关于载体自杀性质粒载体完全可与自己构建,只要保证两点:(一)自杀性质粒载体不能在你的宿主菌里进行复制,也就是说载体上不能有能在宿主菌中复制的复制子。自杀性质粒载体不能在你的宿主菌里进行复制,否则会导致细菌染色体突变株的构建失败。但是在构建时,要注意以下方面:1、在制备质粒载体和DNA插入片断时:2ug 5kb大小的线状DNA大约含有1.4poml/L5'末端磷酸。5‘突出端脱磷需要CIP0.01u/pmolDNA末端,平端
后,你的平板依然会空空如也。 2. 使用失效的PEG PEG(聚乙二醇)是酵母转染过程中的关键试剂,但其配制困难而且及其不稳定;制备的PEG的含量是试验成败的关键,失效的PEG溶液因水分蒸发,水/PEG比率发生改变,应该在每次转染时新配制PEG溶液。或者,配制小批量,并用封口膜牢牢密封。 3. 使用处于静默期的细胞 处于对数生长期的细胞可以有效的整个DNA,但也不是说处于静默期的细胞不能用于转染,只是你的转染成功率会低得多。因此最好使用繁殖最活跃的细胞
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