苄基-十二聚乙二醇/2218463-17-1

植物质膜蛋白的提取和溶解

部分时，即使用如十二烷基硫酸钠（SDS) 这种最高效率的去垢剂，可能在复性整合蛋白质方面效率也是低的。 以使用去污剂 [ 5 ] 、有机溶剂 [ 5~7 ] 或碱性处理膜 [ 5，8，9 ] 为基础的方法被用来分离镶嵌蛋白。其中，作为一种容易的且有效率的方法，碱性提取已得到了广泛普及，在不影响组分完整的情况下，有选择性地从膜上分离外在的蛋白质 [ 10 ] 。在本章中，描述了一个基于用碱性-尿素处理 PM 的方案，此方案能够复性疏水性非常强的蛋白质，如水通道蛋白 [ 11~13

双向电泳前去垢剂和离液剂对蛋白质的增溶作用

] ，或精心选择的非离子型去垢剂 [11] 都可以溶解膜蛋白。有趣的是，Triton X-100 只与尿素合用不如与尿素-硫脲合用更有效 [11] 。这个发现已延伸到其他低聚乙二醇去垢剂家族，如 Brij 去垢剂，如线性烷基寡聚乙二醇化合物 [11] 。然而，最有效的非离子型去垢剂属于糖苷家族（如辛基葡萄糖苷、十二烷基麦芽糖苷），而后者在单独与尿素使用 [12] 和与尿素-硫脲使用 [ 11，13] 同样有效。由于不同去垢剂的选择而引起蛋白质溶解多样化的例子见图 12-1。溶解过程中发挥作用的多种变量

常用溶液的配制

29.224mg 巯基乙醇 0.07ml 甘油 297ml 蒸馏水 加至1000ml 用lNHCl调pH至7.2室温保存。 (二)2％Triton X一100溶液 量取2mlTriton X一100(聚乙二醇辛基苯基醚)液，加M缓冲液98ml即可。