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4°保存
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一年
- 供应商:
钦诚生物
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250ml
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文献和实验实验原理 该技术的原理及过程主要为转移到NC等膜上的蛋白带。用其它蛋白作为封闭液,将膜上余下的其它蛋白可结合点封闭。加入与待检测目标靶蛋白有特异性的第一抗体,经免疫反应,一抗将与目标蛋白结合,再经用洗膜液洗涤后,膜上仅在靶蛋白上结合有第一抗体。再加入与第一抗体有免疫特异性的二抗,使之与一抗反应,反应后,经洗膜液洗涤,二抗就仅存在于结合靶蛋白的一抗上。因为这种二抗都为酶标抗体,所以通过酶标反应,在显色液中,膜上结合靶蛋白-一抗-二抗的位置即将
实验十二 Western印迹鉴定目标蛋白 【实验目的】 1.了解Western blot的原理及其意义,掌握Western blot的操作方法; 2.应用Western blot 技术分析鉴定经SDS-PAGE分离后转移到尼龙膜上的重组
不能干,成功地替换应是膜与塑料袋间形成一层杂交液膜。于42℃杂交过夜(16~20h)。 4.洗膜 按100cm 2 膜用250ml洗膜液计算。 (1)在室温下用2×SSC/0.1%(W/V)SDS溶液漂洗,5min,2次。 (2)在65℃条件下用0.1×SSC/0.1%SDS溶液漂洗,10min,2次。 (3)在室温下用2×SSC溶液漂洗1次。 5.免疫测定 (1)配制溶液 缓冲液1:Tris-HCl(100mmol/L);NaCl
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