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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 保质期:
1年
- 英文名:
IHC chromogen substrate (BCIP/NBT)
- 库存:
大量
- 供应商:
欣博盛
- 规格:
1*15ml
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文献和实验较强的皮肤刺激剂,并有致癌的潜在可能,故使用时应带手套及在通风条件下操作。 5.NBT显色液 试剂A液:5%NBT:称 取0.5gNBT溶于10ml 70%的DMF(二甲基甲胺)内,充分混合,常存于4℃,也可装成小份,-20℃保存,用前复温。 B液:5% BCIP:称取BCIp 0.5g溶于10ml 100%的DMF内,混匀。4℃或分装存于-20℃,用前恢复至室温。 C.显色液:取A液40μl,加入到盛有10ml的0.1mol/l Tris-HCl(pH9.5,钤0.1mol/L NaCl
/LdGTP,0.75 mmol/LdTTP,0.25mol/LFITC-12-dUTP],40ul/每片,37℃孵育30min,不洗,每张切片加入1ulφ29 DNA聚合酶(0.4U/ul),37℃继续反应30min,PBS洗3×3min。(5)免抗FITC-AKP结合物1:1000稀释,37℃30min;PBS洗3× 3min;0.02mol/LTris-HCl(pH9.0内含氯化镁、左旋咪唑)洗20min.(6)NBT/BCIP显色30~240min,核固红衬染。(7)常规树胶封片,结果观察。
) 曝光或是图像设备采集。由于其同样具有持续的发光过程,因此也可以进行多次曝光。在尼龙膜上使用CSPD或CDP-Star底物的杂交,还可进行探针的拨离和重探。 NBT/BCIP 使用类似NBT/BCIP显色底物的好处就在于,检测的过程中不需要X胶片,既可以使用尼龙膜也可以是使用硝化纤维素膜。然而,如果想要获得高灵敏度的检测结果,可能就需要较长的时间了(几个小时)。这种方法也有其不足之处:首先这种方法只能一次性获得信号
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