ELISA AMYLOID-BETA (1-43) (FL)

人脑神经相关生长蛋白-43(GAP-43)ELISA试剂盒 说明书

人脑神经相关生长蛋白-43 ( GAP-43 )ELISA 试剂盒 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 GAP-43 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 GAP-43与单抗结合，加入生物素化的抗人 GAP-43 ，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的 Streptavidin 与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，最后加终止液硫酸，在 450nm 处测 OD 值，GAP-43

别小瞧了ELISA

盒的说明书中，指出温育温度可有两种，例如，一种是37 ℃下1小时，另一种则为43 ℃下45分钟。从免疫测定的抗原抗体反应的本质来看，在较低的温度下反应较长的时间最为完全。如2～8 ℃下反应24小时。较高的反应温度，由于分子运动的加怜惜，反应时间缩短，这一点对分子含量较多的强阳性样本的测定没有问题，但对分子含量少的弱阳性样本则有漏检的可能。因此，我们建议在临床ELISA测定中尽量使用较低温育温度较长反应时间的条件。 （3）“边缘效应”的排除。以前在使用96孔板的ELISA测定中，常发现有“边缘

ELISA 实验操作要点

抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会，只有最贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程，因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么 ELISA 反应总是需要一定时间的温育。 温育常采用的温度有 43℃、37℃、室温和4℃（冰箱温度）等。37℃ 是实验室中常用的保温温度，也是大多数抗原抗体结合的合适温度。在建立 ELISA 方法作反应动力学研究时，实验表明，两次抗原抗体反应一般在 37℃ 经 1-2 小时，产物的生成可达顶峰