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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
500
- 保质期:
12个月
- 供应商:
攸碧艾生物
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
2T/5T
| 规格: | 2T | 产品价格: | ¥638.4 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 5T | 产品价格: | ¥1050.4 |
产品描述:
外泌体鉴定的国际标准《细胞外囊泡杂志MISEV2018》对外泌体的表征规定了最小试验要求:Western Blot对外泌体标志蛋白进行检测,至少需要3个阳性蛋白(至少包括1个跨膜蛋白、1个细胞溶质蛋白)和1个阴性蛋白质标志物。外泌体阳性蛋白标志物可选择跨膜蛋白CD9、CD63、CD81,以及溶质蛋白TSG101、ALIX、HSP70。外泌体阴性蛋白标志物可选择内质网蛋白Calnexin、细胞核蛋白Histone H3或高尔基体蛋白GM130。
本试剂盒2T规格可处理200μl的外泌体,5T规格可处理500μl的外泌体。
使用说明:
1、取100μl新鲜的外泌体或冻存的外泌体至离心管中。
2、向离心管中加入5μl裂解液A轻柔混匀,再加入35μl裂解液B,混匀后置于冰上裂解10min。
3、裂解结束后短暂涡旋一下,4℃,12000g离心15min。
4、离心后取上清液做BCA定量检测蛋白浓度。
5、蛋白提取液中加入1/4蛋白提取液体积的5× Loading Buffer,100℃煮样10min,注意防止爆盖。
6、下同WB的实验步骤。Western Blot (WB)建议稀释比例为1:2000。
注意事项:
1、本产品仅作体外科研使用,不可用于临床诊断或治疗。
2、实验员请穿实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
保存方法:
冰袋运输,-20℃保存,一年有效。
使用范围:
仅限科研使用,不能应用于临床。
为确保信息准确,建议您以随产品附带的纸质说明书为准。电子文档内容可能因版本更新而存在延迟,仅供参考。
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文献和实验可通过传递信息影响目标细胞的功能,激活细胞信号通路,在免疫、凝血、肿瘤等生理病理过程中发挥作用。外泌体可以作为临床诊断中的生物标志物或疾病治疗的靶点,同时也可以作为药物载体,参与神经疾病和癌症等多种疾病的病理过程。 三、关键步骤 — 外泌体分离 外泌体的分离纯度对外泌体的功能研究非常重要,但是外泌体的分离一直是困扰外泌体研究人员的一个难题。虽然分离外泌体方法有很多种,包括差速超速离心法(超离法)、超滤法、密度梯度离心法、免疫磁珠法、试剂盒法等。 但目前
: 准备外泌体样本,并将外泌体样本置于仪器中检测。检测结果如下: 图二 NTA 鉴定脑组织外泌体大小 从 NTA 结果中可以看出,检测到的外泌体颗粒大小在 30-150nm 范围,符合外泌体的大小,且颗粒浓度在 2*10 的 11 次方以上(由图中 particles 数乘以稀释倍数)。 四、WB 鉴定外泌体的蛋白 marker: 按照实验室常规操作进行外泌体样本的 WB 实验。本次测试选择了三个蛋白指标进行外泌体蛋白鉴定,分别为二阳一阴,即 CD9、TSG
、NTA 鉴定外泌体的大小和颗粒浓度: 准备外泌体样本,并将外泌体样本置于仪器中检测。检测结果如下: 图二 NTA 鉴定肿瘤组织外泌体大小 从 NTA 结果中可以看出,检测到的外泌体颗粒大小在 30-150 nm范围,符合外泌体的大小,且颗粒浓度在 3*10 的 10 次方以上(由图中 particles 数乘以稀释倍数)。 四、WB 鉴定外泌体的蛋白 marker: 按照实验室常规操作进行外泌体样本的 WB 实验。本次测试选择了两个蛋白指标进行外泌体蛋白鉴定
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